Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®

——DNA穩定建庫

1、研發背景

穩定的建庫產品，您用對了嗎？

DNA文庫制備是高通量測序前期的核心環節，文庫的產量與質量直接決定了測序數據的產量與質量。但目前市面上多數試劑盒的建庫方法，耗時、昂貴且操作非常繁瑣的。這些方法在性能方面也存在一定的缺陷：如僅適用于DNA量充足且品質較好的樣本、Input DNA-片段化不*、常出現形成G尾、聚合物等副反應或測序文庫表現出一定的偏好性等。這些情況顯著降低了DNA文庫的轉化率，并且極大影響后續測序數據的覆蓋度和準確度。

Yeasen MaxUp，您的高通量測序建庫的！

翊圣生物根據現狀，集中海內外高通量測序領域的科研人員，歷時數年，開發了Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®常規DNA建庫試劑盒，從產品設計，產品原料選用，產品性能優化，產品性能驗證，產品標準制定，到產品成型，產品規模化生產，每一步都在嚴苛的標準、精細的研究中，實現了產品品質的飛躍。

Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®在文庫產量與質量方面表現：DNA的文庫構建步驟少、轉化率高，相對進口同款品牌至少高出20%，使文庫擴增循環數更低，顯著降低了測序數據的冗余度和偏好性。在建庫速度、簡便性、性價比以及樣本適用性方面，達到*品質。

2、產品描述

Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®是針對Illumina^®高通量測序平臺專業開發設計的建庫試劑盒。本試劑盒可將低至1ng的微量片段化DNA制備成適用于Illumina^®測序平臺的文庫。該試劑盒精心優化的配方體系，使他廣泛適用于各種DNA樣本。試劑盒整合了多個酶反應步驟，提供簡并、線性化的操作方案，顯著提高DNA建庫效率。

Hieff NGS^TM產品具有嚴格的生產工藝，保證提供的每批次產品都經過嚴格的質量控制和功能驗證，zui高程度保障產品優異性能與批間穩定性。

1）2.75小時建庫

Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®提供簡并的、線性化的操作方案，將DNA建庫時間縮短至2.75小時以內。

圖1 Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®相對進口品牌N*Ultra同類型產品，建庫更快。

2）文庫轉化率高

文庫轉化率，即DNA-片段轉化為雙端帶特定接頭DNA-片段的效率，是衡量建庫試劑盒效率的重要指標。文庫轉化率強烈影響文庫的多樣性和質量，文庫轉化率高在一定程度上意味著測序覆蓋度更好。

圖2 Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®相對進口品牌N*Ultra同類型產品具有更高的文庫轉化率。

樣本：片段化E.coli gDNA。接頭比例：按各款試劑盒中推薦的數值。測定方法： qPCR文庫定量。

3）文庫擴增循環數少

獲得特定產量文庫所需的PCR循環數，是衡量試劑盒建庫效率的另一重要指標。PCR循環數不足，可能造成文庫產量低；PCR循環數過高，又將導致文庫偏好性增加、冗余度增加、嵌合產物增加、擴增突變積累等多種不良后果。在獲得相同產量文庫時，使用的PCR循環數越少，表示試劑盒的建庫效率更高。

表1 Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®相對進口品牌N*Ultra同類型產品具有更低的擴增循環數。

4）優異的文庫質量

使用Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®對100 ng E.coli gDNA建庫，所得文庫均為單一條帶，正態分布，無雜峰，片段大小符合測序要求。

圖3 Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®所建文庫Agilent 2100 Bioanalyzer檢測。

建庫樣本：片段化E. coli gDNA。雙輪分選比例（Post-adapter Ligation）：0.6×/0.2×和0.55×/0.15×。

5）的測序數據

測序數據是反映建庫試劑盒性能的zui重要指標。使用Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®和N*Ultra品牌同類型產品用于大腸桿菌基因組DNA文庫構建，并使用Illumina^® Hiseq 4000平臺，以PE150模式進行測序。所得Q30、堿基質量，Mapped Reads以及Coverage等方面均與品牌N*Ultra同類型產品相當，表現優異。

表2 大腸桿菌K12菌株基因組DNA測序數據統計。

Input DNA: 100ng. Illumina Hiseq 4000, PE 150, reference genome: Escherichia coli str. K-12 substr. MG1655.

圖4. Yeasen樣品測序數據Fastqc報告（左：序列質量分布；右：堿基分布）。

6）*的性價比

Yeasen致力于為您提供的產品！！

圖5 Hieff NGS^TM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina^®性價比更高。

3、產品應用：

將1ng-1μg片段化DNA制備成適用于Illumina^®測序平臺的文庫。

4、文獻引用

[1] Head S R, Komori H K, LaMere S A, et al. Library construction for next-generation sequencing: overviews and challenges[J]. Biotechniques, 2014, 56(2): 61.

[2] Parkinson N J, Maslau S, Ferneyhough B, et al. Preparation of high-quality next-generation sequencing libraries from picogram quantities of target DNA[J]. Genome research, 2012, 22(1): 125-133.

[3] van Dijk E L, Jaszczyszyn Y, Thermes C. Library preparation methods for next-generation sequencing: tone down the bias[J]. Experimental cell research, 2014, 322(1): 12-20.

[4] Wolf K, O'Neil D, Schroeer S, et al. Next‐Generation Sequencing Library Preparation from FFPE Tissue Samples[J]. Current Protocols in Molecular Biology, 2016: 7.24. 1-7.24. 14.

[5] Apone L, Liu P, Panchapakesa V, et al. Enhancing clinical utility of NGS with reduced bias, low DNA input, library construction[J]. 2016.

5、常見問題

Q: 該款試劑盒適用于哪些樣本的建庫？

A：本試劑盒適用于所有樣本的DNA建庫。

Q: 在使用該款試劑盒時，不同類型的樣本的Input DNA量應為多少？

A：Input DNA特指投入末端修復/dA尾添加步驟中的DNA。下表列舉了本試劑盒在常見應用中推薦的Input DNA量。

表1 常見應用中推薦Input DNA量

【注】：上表為使用高質量DNA時推薦的Input DNA量，當Input DNA質量較差或需要進行片段分選時，應適當上調使用量。

Q: 文庫制備過程中，是否需要片段長度分選？

A：文庫制備過程中需要進行片段長度分選。分選步驟可選擇在末端修復/dA尾添加之前，或在接頭連接之后，或在文庫擴增之后進行。當Input DNA質量≥50ng，您可選擇在接頭連接后分選；如Input DNA質量<50ng，建議您在文庫擴增后進行分選。

Q: 使用該款試劑盒所得的文庫是否可以用于Ion Torrent平臺？

A：本款試劑盒針對Illumina^®平臺開發，所得文庫僅適用于Illumina^®平臺。

Q: 產品的有效期與保存方法？

A：產品所有組分-20°C保存，有效期1年。

Q: 純化和分選步驟，可以使用哪些磁珠？

A：純化和分選步驟，建議使用Hieff NGS^TM DNA Selection Beads（Cat#12601）或AMPure XP Beads（Cat#A63880）或其他等效產品。

6、訂購信息

7、相關產品推薦

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