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上海拜力生物科技有限公司

D-乳酸ELISA試劑盒制備的詳細步驟

時間:2018-10-9閱讀:456

D-乳酸ELISA試劑盒 制備的詳細步驟

儀器設(shè)備的準備也* 相關(guān)設(shè)備包括移液器、洗板機/搖床和酶標儀。移液器的準確性對于ELISA實驗結(jié)果的可靠性十分關(guān)鍵,需要確保定期校準維護。搖床的使用是為了讓反應(yīng)體系快速達到平衡,獲得穩(wěn)定、可重復的結(jié)果。不用搖床對實驗通常的影響是,OD 值低,CV 大。酶標儀等設(shè)備使用前提前 15 分鐘開機預熱。

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引起 ELISA 測定結(jié)果與文獻報導不一致的原因主要有三點,試劑因素、標本因素和操作因素。試劑因素:1. 試劑應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、操作方便的試劑。 2.不同廠家的試劑一定不能混用,包括底物和洗滌液。由于校準標準有差異,還有抗體、檢測方法、試劑、交叉反應(yīng)等因素都會導致對樣本的檢測結(jié)果不一致。如:有的廠家酶標板孔間 CV 值大于 20%,標記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定性比較差,使用劣質(zhì)的試劑必然導致結(jié)果的假陽性或假陰性。 3. 要注意試劑的批號和出廠日期,雖然試劑的有效期多為 1 年,好選擇剛出廠的試劑盒。 4. 避免選擇假的 ELISA 試劑盒。有些廠家為夸大生產(chǎn) ELISA 的指標范圍,用一種指標來冒充其它指標,造成各種種屬、各種指標都可以做的假象。標本因素和操作因素:血清是常用的 ELISA 標本,血漿一般可視為與血清同等的標本,標本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種。 內(nèi)源性物質(zhì):有人認為大約 40%的人血清標本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有:類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠 Ig (s) 抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。外源性物質(zhì):外源性物質(zhì)常常是由于用于 ELISA 測定的血標本的采集、貯存等不當所致。如標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存過久、標本凝集不全和采血管中添加物等影響。

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編輯:小檀20181009

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