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磷酸烯醇式酸羧化酶（PEPC）活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
貨號：BC2190
規格：50T/48S

產品說明：
磷酸烯醇式*酸羧化酶（EC 4.1.1.31）廣泛存在于植物和微生物中，在動物及絲狀霉菌中缺乏此酶。是催化 磷酸烯醇式*酸與二氧化碳反應生成草酰乙酸呈不可逆反應的酶，同時也是 C4 植物和 CAM 植物固定 CO2 的 關鍵酶，對三羧酸循環的運轉起重要調節作用。 PEPC 催化磷酸烯醇式*酸和 CO2 生成草酰乙酸和 HPO4 2-，蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和 NADH 生 成蘋果酸和 NAD+，在 340nm 測定 NADH 減少速率，計算 PEPC 活性。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、1mL 石英比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、冰 和蒸餾水。

注意事項：

1. 為保證實驗結果的準確性，需先取 1-2 個樣做預實驗，ΔA 大于 0.6 時，建議將粗酶液用提取液稀釋后再進行測定，當 ΔA 小于 0.01 時，可以延長反應時間（10min 或 15min）來測定。

2.  空白管為檢測各試劑組分質量的檢測孔，正常情況下，變化不超過 0.02。

參考文獻：
[1] Zhang Y H, Wang Z M, Huang Q, et al. Phosphoenolpyruvate carboxylase activity in ear organs is related to protein concentration in grains of winter wheat[J]. Journal of cereal science, 2008, 47(2): 386-391.
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