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基于標記的糖蛋白質組學定量策略全解析檢測技術服務詳情介紹
糖蛋白廣泛分布于哺乳動物細胞表面及胞外環境,在細胞識別、信號轉導、免疫應答等過程中發揮核心作用。糖基化修飾的動態變化已被證實與多種疾病密切相關,尤其在腫瘤、神經退行性疾病及炎癥反應中,糖蛋白的表達與功能呈現出高度異質性。因此,實現糖dànbáizhì組的高通量定量,對于深入理解其生物學意義具有重要價值。
一、糖dànbáizhì組定量的核心挑戰
糖dànbáizhì組研究面臨多個技術瓶頸:糖基化修飾具有結構異質性且豐度低,難以直接在復雜樣本中檢測;富集步驟易引入非特異性背景;糖肽在質譜分析中易出現碎裂效率低、信號抑制等問題。為實現準確、可重復的定量分析,需要構建高效、穩定的技術流程。
二、基于標記的定量策略概覽
基于標記的定量策略通過在不同樣本中引入可區分的質量標簽,使多個條件下的糖蛋白在單次質譜分析中實現jīngquè比較。按標記方式分類,主要包括同位素代謝標記、肽段化學標記兩大類。
1、同位素代謝標記(SILAC)
SILAC通過細胞培養階段引入含穩定同位素的氨基酸,實現蛋白層面的內源性標記。標記后的細胞可直接用于蛋白提取、糖肽富集及質譜分析,避免了人工化學修飾帶來的變異。
優勢:標記效率高,樣本間變異小,適用于動態糖蛋白表達研究。
局限:僅適用于可培養細胞,對組織、血清等樣本不適用。
2、肽段化學標記(TMT/iTRAQ等)
該類策略通過與肽段N端或賴氨酸殘基反應引入質量標簽,允許zuì多16個樣本同時進行定量比較。該方法適用于大多數樣本類型,特別適合大規模生物標本的平行分析。
優勢:通量高,適配性強,可同時進行定性與定量分析。
局限:標簽間串擾(ratio compression)可能導致低豐度糖肽定量偏差,需借助高分辨質譜和優化方法進行糾正。
3、其他化學標記方法
如二甲基標記(Dimethyl Labeling)、DiLeu等策略以更低成本實現多樣本定量,適用于需要靈活適配不同質譜平臺的研究場景。這類方法在確保定量精度的同時,也可根據研究需求靈活調整樣本通量和標記方案。
三、糖肽富集策略與biāojìdìng量的協同優化
由于糖肽在樣本中豐度極低,需在定量前進行有效富集。常用富集技術包括:
Lectin親和富集:依賴凝集素識別特定糖結構,選擇性高;
HILIC富集:利用糖肽疏水性差異進行選擇性保留;
TiO?富集:可用于O-糖肽和富含羧基結構的糖肽捕獲。
不同定量策略對富集順序和方法有不同要求。例如,在TMT標記流程中建議“標記后富集”,以減少干擾反應和非特異性修飾;而在SILAC體系中,由于蛋白已內源性標記,富集順序可更為靈活。為提高定量準確性,推薦使用混合碎裂模式(HCD與EThcD)聯合采集,提升糖肽結構解析能力;同時應選用具備糖基化識別能力的數據庫搜索引擎,結合定量校正算法進行后處理。
四、應用場景與未來展望
基于標記的糖dànbáizhì組定量策略已廣泛應用于以下研究方向:
腫瘤生物標志物篩選:挖掘癌組織與正常組織間的差異性糖基化模式;
免疫系統調控機制研究:探索免疫細胞表面糖蛋白在激活與抑制過程中的動態變化;
藥物靶點驗證與機制解析:在受體識別與信號轉導環節中定位關鍵糖蛋白分子。
隨著質譜靈敏度提升、糖肽數據庫完善及數據分析算法優化,糖dànbáizhì組學的定量研究將更趨jīngzhǔn與高效。未來,這一技術有望在疾病早篩、jīngzhǔn醫療、生物藥開發等領域實現更廣泛的轉化應用。
基于標記的糖dànbáizhì組定量策略正逐步成為解析復雜生物過程的關鍵技術之一。百泰派克生物科技提供覆蓋SILAC、TMT等多類型標簽策略的一站式糖dànbáizhì組定量服務。通過整合高效標記體系、jīngzhǔn富集方法與*質譜平臺,我們致力于為科研人員與生物醫藥企業提供高質量的服務,助力科研成果向臨床轉化邁進。如您正在探索糖dànbáizhì組的研究方案,歡迎聯系我們,獲取zhuānyè咨詢與項目支持。
百泰派克生物科技特色項目
一、蛋白測序
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優勢:
1.采用目前世界上*的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
二、dànbáizhì組學
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析,發現新的生物標記物;
2.體內體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統準確。
三、單細胞質譜流式技術分析
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
※服務優勢:
1.技術*,*技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現了數量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
五、生物藥物表征
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務,幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。
百泰派克生物科技七大檢測平臺
百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質譜多組學優質服務商
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數據冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。
1.公司采用ISO9001質量控制體系,zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務;
2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務;
3.業務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等;
4.七大質量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;
5.服務3000+企業,10000+客戶的選擇;
6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!