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肽片段化檢測技術服務詳情介紹
肽片段化通過將大分子dànbáizhì分解成較小的肽段,以便進行后續的質譜分析、dànbáizhì鑒定、序列解析和功能研究。dànbáizhì的結構和功能直接影響生物體的健康和疾病狀態,因此jīngquè識別和解析dànbáizhì的結構特征至關重要,但是dànbáizhì本身通常具有復雜的三維結構和龐大的分子量,使得它們的直接分析和鑒定變得困難。肽片段化技術通過將dànbáizhì切割成多個較小的肽片段,使得這些片段更容易通過質譜等技術進行分析,從而為研究人員提供dànbáizhì的詳細信息。這項技術通常依賴于dànbáizhì水解酶,如yídànbáiméi、guāngānsuān酶或其他特定酶類,通過特異性切割dànbáizhì分子中的肽鍵,產生一系列長度適中、帶有可識別特征的肽段。每一個肽段通常包含10到30個氨基酸殘基,這樣的肽段不僅容易進入質譜儀進行離子化,而且其質荷比(m/z)可以通過質譜分析儀進行高精度測量,從而揭示出肽段的氨基酸序列。通過這項技術,研究人員能夠更好地解析dànbáizhì的氨基酸序列,進而推測出dànbáizhì的三維結構和功能區域,深入了解dànbáizhì在細胞內的作用。
一、肽片段化的關鍵步驟
1、dànbáizhì提取與純化
在進行肽片段化之前,首先需要從生物樣品中提取和純化目標dànbáizhì,常見的dànbáizhì提取方法包括細胞裂解、離心分離以及不同的色譜技術。dànbáizhì的純度對后續的片段化和分析至關重要,因此在提取過程中需要確保樣品中盡可能沒有其他雜質。
2、dànbáizhì水解
一旦目標dànbáizhì被提取并純化,接下來就是dànbáizhì的水解過程,常用的水解酶如yídànbáiméi、guāngānsuān酶和肽酶等,它們通過特異性切割dànbáizhì分子中的肽鍵,將大分子dànbáizhì分解為多個肽段。不同的水解酶可以根據需要選擇,以產生適合分析的肽片段;例如,yídànbáiméi通常切割氨基酸殘基中的賴氨酸和jīngānsuān,產生帶有基本氨基的肽段,適合質譜分析。
3、肽段分離與純化
在水解后,產生的肽段通常具有不同的分子量和化學性質,因此需要對這些肽段進行分離和純化,常用的分離方法包括反相高效液相色譜(RP-HPLC)、凝膠電泳等;通過這些方法,可以將不同的肽段分離開來以便后續進行單獨分析。
4、質譜分析
質譜分析是肽片段化的核心步驟,通過對肽段進行離子化和分析,可以準確測量肽段的質荷比(m/z)。質譜儀可以通過串聯質譜(MS/MS)技術進一步對肽段進行碎片化分析,推測肽段的氨基酸序列。質譜數據通過與dànbáizhì數據庫進行比對,可以識別出肽段所屬的dànbáizhì,并揭示dànbáizhì的結構信息。
5、數據分析與dànbáizhì鑒定
肽片段化的zuì終目標是通過質譜數據來識別和定量目標dànbáizhì。質譜數據需要通過專門的軟件進行分析,確定肽段的序列和來源;通過與已有的dànbáizhì數據庫比對,可以完成對未知dànbáizhì的鑒定并進一步進行功能注釋和結構預測。
二、肽片段化的分析方法
1、質譜(MS)
質譜分析是肽片段化的核心分析手段之一。質譜儀通過測定離子化肽段的質荷比能夠對肽段的分子量和序列進行jīngquè測量;串聯質譜(MS/MS)技術通過進一步的離子碎片化,提供了更高分辨率的序列信息,幫助研究人員深入解析復雜的肽段結構。
2、液相色譜-質譜聯用(LC-MS)
液相色譜-質譜聯用(LC-MS)技術常用于肽片段化分析。該方法結合了液相色譜的分離能力和質譜的高精度測量能力,能夠有效分離和鑒定肽段。LC-MS是當前dànbáizhì組學研究中zuì常用的技術之一,尤其適用于復雜樣品中的肽段分析。
3、高分辨率質譜
隨著質譜技術的不斷進步,高分辨率質譜儀可以提供更精細的質荷比測量和更高的靈敏度,進一步提高了肽片段化分析的準確性。這使得研究人員能夠識別低豐度的肽段,并對復雜生物樣本中的dànbáizhì進行全面鑒定。
4、數據分析與比對
質譜數據的分析是肽片段化過程中bùkěhuòquē的一步,通過專門的軟件(如Mascot、Sequest等),可以將質譜數據與dànbáizhì數據庫進行比對,從而推測出肽段的氨基酸序列和來源的dànbáizhì。這一過程對于dànbáizhì組學研究中的dànbáizhì鑒定和定量分析至關重要。
三、肽片段化的應用
1、dànbáizhì組學研究
肽片段化是dànbáizhì組學分析中的重要環節,它幫助研究人員識別和定量復雜生物樣本中的dànbáizhì;通過高通量的肽片段化技術,科研人員能夠全面了解細胞、組織或液體樣本中的dànbáizhì組成,揭示生物體內的分子機制。
2、疾病生物標志物發現
在疾病研究中,肽片段化技術能夠幫助發現新的生物標志物,尤其是在癌癥、神經退行性疾病等領域;過對疾病患者和健康人群的樣本進行比較分析,可以識別與疾病相關的特異性dànbáizhì或肽段,為早期診斷和治療提供有力支持。
3、藥物篩選與靶點發現
這項技術在藥物篩選中發揮著重要作用,尤其是在新藥靶點的發現和優化過程中,它可以幫助研究人員更好地理解藥物分子如何與靶標dànbáizhì相互作用,幫助藥物研發人員優化藥物的設計。
肽片段化技術作為dànbáizhì組學中的核心步驟,極大地推動了我們對dànbáizhì結構與功能的理解。百泰派克生物科技憑借優良的質譜平臺和豐富的技術經驗,提供zhuānyè的肽片段化服務,幫助客戶高效、jīngzhǔn地解析dànbáizhì,為科研人員和企業在dànbáizhì組學領域提供強有力的技術支持。
百泰派克生物科技特色項目
一、蛋白測序
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優勢:
1.采用目前世界上優良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
二、dànbáizhì組學
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析,發現新的生物標記物;
2.體內體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統準確。
三、單細胞質譜流式技術分析
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
※服務優勢:
1.技術優良,*技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現了數量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
五、生物藥物表征
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務,幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。
百泰派克生物科技七大檢測平臺
百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質譜多組學優質服務商
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數據冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。
1.公司采用ISO9001質量控制體系,zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務;
2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務;
3.業務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等;
4.七大質量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;
5.服務3000+企業,10000+客戶的選擇;
6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!