CD光譜到底能告訴我們蛋白質哪些信息？檢測技術服務詳情介紹

在現代dànbáizhì研究中，圓二色譜（Circular Dichroism, CD）光譜是廣泛應用、操作簡便的分析技術。它通過檢測光與手性分子相互作用所產生的差異性吸收，為我們揭示dànbáizhì結構的多個關鍵層面。盡管CD光譜提供的信息相對間接，但其在快速結構評估、構象變化監測及dànbáizhì穩定性研究中的作用bùkětìdài。

一、CD光譜的基本原理

CD光譜是基于圓偏振光的分光技術，用以探測手性分子對左右旋圓偏振光吸收強度的差異。由于dànbáizhì是由手性氨基酸組成的天然聚合物，其二級結構元素（如α-螺旋、β-折疊和無規卷曲）對圓偏振光具有不同的響應特性。因此，通過分析遠紫外區域（190–250 nm）CD信號，可以獲得dànbáizhì二級結構的總體分布信息；而近紫外區域（250–320 nm）則提供芳香族殘基和二硫鍵的局部環境信息，反映dànbáizhì三級結構的緊致性和折疊狀態。

二、dànbáizhì二級結構的定性與定量評估

CD光譜zuì直接的應用之一，是判斷dànbáizhì的二級結構構成。典型的α-螺旋結構在208nm和222nm處表現出強烈的負峰，而β-折疊則在218nm附近呈現一個較寬的負峰，并在195nm附近出現正峰。無規卷曲結構通常在195nm處有一個寬廣的負峰，缺乏明顯的特征信號。通過與已知結構的CD譜庫進行比對，研究者可以借助計算算法對未知樣品的二級結構比例進行估算。這對于dànbáizhì構建、突變體驗證以及重組表達產物的折疊質量評估具有重要意義。尤其在結構功能關系研究中，CD光譜可幫助判斷某些功能缺失是否與二級結構擾動有關。

三、dànbáizhì折疊與構象變化的監測

dànbáizhì在溶液中并非靜態存在，其構象狀態可能受到pH、離子強度、有機溶劑、配體結合、突變等因素的影響而發生變化。CD光譜作為實時監測工具，能夠在非破壞條件下反映這些動態變化。例如，在配體結合實驗中，CD譜圖的變化可指示dànbáizhì構象的調整，幫助確認結合事件是否引發結構重排；在折疊動力學研究中，CD配合溫度躍變或時間分辨實驗可揭示中間體狀態的存在與轉變路徑。這種“結構敏感性”使CD光譜成為研究dànbáizhì適應性變化、構象柔性和功能機制的重要工具，尤其在缺乏高分辨率三維結構的早期研究階段更顯其價值。

四、dànbáizhì熱穩定性和變性行為分析

熱變性實驗是評估dànbáizhì穩定性的重要手段，而CD光譜可提供該過程中的結構變化信息。通過在不同溫度下采集CD信號（通常在222nm或208 nm），可獲得一條變性曲線，進而計算變性溫度（Tm）這一關鍵參數。Tm值反映dànbáizhì從折疊態到非折疊態的轉變點，是比較不同突變體、不同表達體系、或不同緩沖體系下dànbáizhì穩定性差異的可靠依據。此類信息在dànbáizhì工程、疫苗設計及生物藥開發中具有實際指導意義。此外，對于部分dànbáizhì還可觀察是否具有可逆折疊能力，即熱變性是否伴隨不可逆聚集過程，這對于優化儲存條件和制劑開發至關重要。

五、dànbáizhì三級結構的間接指示

雖然CD光譜無法提供三級結構的原子分辨率圖像，但近紫外區（250–320nm）可提供有限的折疊狀態線索。該區域的信號主要來源于làoānsuān、sèānsuān和苯bǐngānsuān等芳香族殘基的手性環境，以及二硫鍵的構象狀態。一個完整折疊的dànbáizhì往往在近紫外區域呈現較為復雜、分布廣泛的譜圖特征；而結構松散、部分未折疊的蛋白則表現出信號減弱甚至wánquán消失的情況。因此，近紫外CD可以作為判斷dànbáizhì是否處于天然構象、以及在不同條件下是否存在局部解折疊的重要補充手段。

六、CD光譜的優勢

• 操作簡便，無需結晶或特殊標記；

• 對dànbáizhì濃度和體積要求較低；

• 適用于溶液態原位分析；

• 可實現快速、實時數據獲取。

CD光譜能夠快速提供二級結構比例、構象狀態、熱穩定性等信息，是評估dànbáizhì質量與功能狀態的可靠工具。對于從分子機制研究到蛋白藥物開發的多個環節，CD光譜都是高效且實用的“結構監測哨兵”。在多組學交叉的生命科學時代，像CD光譜這樣兼具靈敏性和操作便捷性的技術，將持續發揮重要作用。百泰派克生物科技專注于生命科學研究服務，致力于為科研人員和生物醫藥企業提供高質量、可信賴的dànbáizhì圓二色譜分析服務。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優勢：

1.采用目前世界上優良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析，發現新的生物標記物;

2.體內體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。

※服務優勢：

1.技術優良，*技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現了數量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務，幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數據冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務；

3.業務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!

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