StartScript II cDNA 第一鏈合成試劑盒含有兩種經過優化的混合液：StartScript II 酶混合液和 StartScript II 反應混合液。酶混合液含 StartScript II 反轉錄酶和小鼠 RNase 抑制劑；反應混合液含 dNTP 和經優化的緩沖液。StartScript II 反轉錄酶是重組 M-MLV 反轉錄酶，降低了 RNase H 活性且提高了熱穩定性。與野生型 M-MLV 反轉錄酶相比，StartScript II 反轉錄酶可在更高的溫度下合成第一鏈 cDNA。該酶的活性溫度高達 48℃，且具有特異性高、cDNA 產量高的特點。

該試劑盒還提供兩種經優化的反轉錄引物與無核酸酶水污染的水。Oligo-dT 引物 [d（T）23VN] 能與 poly（A） 尾的起始端退火。經優化的隨機引物混合液能隨機并持續性地與整個 RNA 模板配對，包括 mRNA 與無 poly（A） 尾的 RNA。合成的第一鏈 cDNA 產物長度可達 10kb。