蛋白質(zhì)分子量測定：關(guān)鍵技術(shù)、未來前景檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

dànbáizhì分子量測定廣泛應(yīng)用于dànbáizhì結(jié)構(gòu)解析、功能研究、藥物開發(fā)、疾病診斷等領(lǐng)域。準(zhǔn)確的分子量測定不僅有助于理解dànbáizhì的結(jié)構(gòu)和功能，還能用于鑒定dànbáizhì的修飾狀態(tài)、聚集行為和復(fù)合物組成。目前，已開發(fā)出多種測定dànbáizhì分子量的方法，包括凝膠電泳、質(zhì)譜分析、超速離心、凝膠過濾色譜、光散射技術(shù)和核磁共振等。不同方法各有優(yōu)劣，適用于不同類型的dànbáizhì及實(shí)驗需求。百泰派克生物科技在本文為您系統(tǒng)地介紹這些技術(shù)的概述，探討其局限性，并展望未來發(fā)展趨勢。

一、dànbáizhì分子量測定的關(guān)鍵技術(shù)

1、SDS-PAGE（十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳）

（1）原理

SDS-PAGE 是基于dànbáizhì在SDS（十二烷基硫酸鈉）變性作用下的電泳遷移率差異進(jìn)行分子量測定的方法。SDS使dànbáizhì帶上均一的負(fù)電荷，使分子量成為影響遷移速率的主要因素。

（2）優(yōu)點(diǎn)

* 簡便快捷，實(shí)驗設(shè)備要求低。

• 廣泛適用，適用于大多數(shù)dànbáizhì的分子量估算。

• 可同時分析多個樣品，成本較低。

（3）局限性

* 精度較低，只能提供分子量的相對估計。

• 不能區(qū)分具有相同分子量但不同構(gòu)象的蛋白。

• 對糖蛋白等特殊dànbáizhì可能產(chǎn)生誤導(dǎo)性結(jié)果。

2、質(zhì)譜分析（Mass Spectrometry, MS）

（1）原理

質(zhì)譜技術(shù)利用離子化的方法將dànbáizhì分子解離成帶電粒子，并通過質(zhì)荷比（m/z） 進(jìn)行分離和檢測，以測定dànbáizhì的分子量。常見的離子化方法包括基質(zhì)輔助激光解吸/電離（MALDI） 和電噴霧離子化（ESI）。

（2）優(yōu)點(diǎn)

* 高精度，可達(dá)到±0.01% 以內(nèi)的誤差。

• 適用于dànbáizhì修飾研究，如磷酸化、乙酰化等翻譯后修飾。

• 檢測靈敏度高，適用于低濃度樣品。

（3）局限性

* 樣品需要純化，雜質(zhì)可能干擾檢測。

• 大型復(fù)合蛋白難以直接分析，需要額外的解離策略。

• 需要昂貴儀器，實(shí)驗成本高。

3、超速離心分析（Analytical Ultracentrifugation, AUC）

（1）原理

AUC 通過高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的離心力測量dànbáizhì在溶液中的沉降行為，從而推算分子量。主要有沉降速率法（SV） 和沉降平衡法（SE） 兩種模式。

（2）優(yōu)點(diǎn)

* 可測量天然狀態(tài)下的dànbáizhì分子量，不依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線。

• 可用于研究dànbáizhì聚集狀態(tài) 和 寡聚化程度。

• 可用于測定蛋白復(fù)合體的真實(shí)分子量。

（3）局限性

* 實(shí)驗時間較長，通常需12-48小時。

• 數(shù)據(jù)分析復(fù)雜，需要zhuānyè軟件（如 SEDFIT）。

• 儀器昂貴，操作需要zhuānyè培訓(xùn)。

4、凝膠過濾色譜（Size Exclusion Chromatography, SEC）

（1）原理

SEC 基于dànbáizhì分子在凝膠顆粒間的不同擴(kuò)散行為進(jìn)行分離，大分子較快通過柱子，小分子則滯留時間較長。dànbáizhì的洗脫體積與其分子量相關(guān)。

（2）優(yōu)點(diǎn)

* 非變性方法，可測定dànbáizhì的天然構(gòu)象和聚集狀態(tài)。

• 可與HPLC或MS聯(lián)用，增強(qiáng)檢測能力。

• 樣品回收率高，適用于dànbáizhì純化。

（3）局限性

* 需要校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品，誤差較大。

• 對非球形蛋白精度較低，如纖維狀蛋白。

• 樣品濃度要求較高，低濃度蛋白難以檢測。

5、光散射技術(shù)（Multi-Angle Light Scattering, MALS）

（1）原理

MALS 通過測量dànbáizhì分子散射的光強(qiáng)度與角度關(guān)系來計算其分子量，常與SEC聯(lián)用（SEC-MALS）。

（2）優(yōu)點(diǎn)

* 無需標(biāo)準(zhǔn)品，直接測定分子量。

• 適用于非球形蛋白，不受形狀影響。

• 可分析dànbáizhì的聚集狀態(tài)。

（3）局限性

* 對樣品濃度敏感，低濃度蛋白信號較弱。

• 數(shù)據(jù)處理復(fù)雜，需要zhuānyè軟件。

二、dànbáizhì分子量測定未來發(fā)展趨勢

1、結(jié)合多種技術(shù)以提高準(zhǔn)確性

未來的dànbáizhì分子量測定可能更多地依賴多種技術(shù)的結(jié)合，例如SEC-MALS-MS（將凝膠過濾、光散射和質(zhì)譜結(jié)合）可實(shí)現(xiàn)更jīngzhǔn的分子量測定。

2、發(fā)展新型高通量測定方法

隨著生物醫(yī)藥研究的發(fā)展，高通量蛋白分析技術(shù)（如微流控芯片、單分子技術(shù)）將成為趨勢，提高測定效率和數(shù)據(jù)可靠性。

3、AI與機(jī)器學(xué)習(xí)輔助數(shù)據(jù)分析

人工智能和機(jī)器學(xué)習(xí)可用于優(yōu)化dànbáizhì分子量數(shù)據(jù)分析，提高模型擬合精度，降低實(shí)驗誤差。

4、開發(fā)更高靈敏度的新型檢測技術(shù)

如超高分辨率質(zhì)譜（HRMS）和低濃度蛋白分析技術(shù)的發(fā)展，使得更復(fù)雜的dànbáizhì樣本也能得到準(zhǔn)確的分子量測定。

dànbáizhì分子量測定的各種技術(shù)在精度、適用性和局限性方面有所不同。未來的發(fā)展方向?qū)⒅赜谔岣呔取⒆詣踊瘷z測、高通量分析及數(shù)據(jù)智能化。在dànbáizhì分子量測定領(lǐng)域，百泰派克生物科技致力于提供前沿的技術(shù)支持和服務(wù)。我們憑借優(yōu)良的實(shí)驗設(shè)施和zhuānyè的研究團(tuán)隊，為客戶提供jīngzhǔn、高效的dànbáizhì分析解決方案。期待與您的合作。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實(shí)驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細(xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實(shí)驗室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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