StarLighter DNase I
StarLighter DNA酶 I
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
啟衡星 DNase I (Deoxyribonuclease I) 是一種可酶切單鏈和雙鏈 DNA 的核酸內(nèi)切酶，無 RNase 活性。它可以水解磷酸二酯鍵，產(chǎn)生帶有 5’-磷酸基團(tuán)和 3’-羥基基團(tuán)的單脫氧核糖核苷酸和寡脫氧核糖核苷酸。該酶的活性嚴(yán)格依賴于鈣離子，由鎂離子或錳離子活化。鎂離子存在條件下，DNase I 可在雙鏈 DNA 的單鏈上隨機(jī)位點(diǎn)進(jìn)行剪切；錳離子存在條件下，DNase I 可在同一位點(diǎn)剪切 DNA 雙鏈，形成平末端，或 1-2個(gè)核苷酸突出的粘末端。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1. 重組酶；
2. 無內(nèi)源性RNase，來源于非動(dòng)物宿主；
3. 10 mM EDTA 65°C 處理10 min 即可失活。
產(chǎn)品應(yīng)用
1. 制備不含 DNA 的 RNA 樣品；
2. 在 RT-PCR 和 RT-qPCR 之前制備無DNA 污染的 RNA；
3. 采用 DNase I 足跡法進(jìn)行 DNA－蛋白相互作用研究。
產(chǎn)品性能
1、消化能力強(qiáng)

用啟衡星 DNase I 與其他品牌的 DNase I 消化相同量的 dsDNA 樣本和 ssDNA 樣本，消化后電泳如圖所示，啟 衡星的 DNase I 消化能力與進(jìn)口產(chǎn)品相當(dāng)。

2、無 RNase 污染

Tab.1 StarLight DNase I 中 RNase 污染檢測(cè)分析。供應(yīng)商 3：某進(jìn)口品牌一步法 gDNA 去除試劑。 以 100 ng RNA 和 100 ng RNA+500 ng 人 gDNA 作為反應(yīng)模板，在 10 μL 反應(yīng)體系中加入 0.5 U DNase I，37℃ 消化 10 min, 失活處理。用 cDNA 引物 TBP 進(jìn)行 RT- qPCR 檢測(cè)，經(jīng) DNase I 處理的 RNA 與未經(jīng) DNase Ι 處理 的 RNA 和 RT-qPCR 單加 RNA 陽(yáng)性對(duì)照 Ct 值一致，說明 DNase I 中無 RNase I 污染。

3、失活處理簡(jiǎn)單

Fig.3 StarLight DNase I 失活電泳圖

v> 使用 10 mM EDTA 處理 DNase I，65℃ 孵育 15 min，使其失活，再加入 pet 28a 質(zhì)粒 37℃ 孵育 30 min，瓊脂糖凝膠電泳顯示未見有明顯變化。