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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>生化試劑>其它生化試劑>R1090-100ml RIPA裂解液(中)

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R1090-100ml RIPA裂解液(中)

參考價280.00
具體成交價以合同協議為準
規格
100ml280.00元999 ml可售

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北京蘭博利德商貿有限公司,成立于2007年。 專業從事生命科學方面的服務,為客戶提供試劑、耗材、儀器等產品,主要涵蓋生物化學、分子生物學、細胞生物學、微生物學、植物學、免疫學、免疫診斷、分子診斷等領域。


我公司有一支具有高度專業化的團隊,主要成員都來自于生物消耗品行業的的企業,有多年的從業經驗,可以為客戶提供標準化、專業化的服務。同時,生物行業的專家為我公司的發展提供戰略發展方面的資訊。


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生命科學產品、生化試劑、實驗室耗材等

供貨周期 現貨 貨號 R1090

      RIPA裂解液(中)

貨號:R1090-100ml

保存條件:-20℃。

產品簡介:

RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的Western、IP等。
RIPA裂解液(中)的主要成分為50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1% NP-40,0.5% sodium deoxycholate,0.1% SDS,以及sodium orthovanadate,odium fluoride,EDTA,leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白降解。

注意事項:    

1、為取得最佳的使用效果,盡量避免過多的反復凍融。可以適當分裝后使用。

2、裂解樣品的所有步驟都需在冰上或4℃進行。

使用說明:

對于培養細胞樣品:  

1.融解RIPA裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入PMSF,使PMSF的最終濃度為1mM。

2.對于貼壁細胞:去除培養液,用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1-2秒后,細胞就會被裂解。

3.對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成50-100萬細胞/管,然后再裂解。

4.充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

裂解液用量說明:

通常6孔板每孔細胞加入150微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到200微升或250微升。


對于組織樣品:

1.把組織jian切成細小的碎片。

2.融解RIPA裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入PMSF,使PMSF的最終濃度為1mM。

3.按照每20毫克組織加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高

濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量。)

4.用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

5.充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

6.如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

注:RIPA裂解液的裂解產物中經常會出現一小團透明膠狀物,屬正常現象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。在不檢測和基因組DNA結合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續實驗;如果需要檢測和基因組結合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續實驗。如果檢測一些常見的轉錄因子,例如NF-kappaB、p53等時,通常不必進行超聲處理,就可以檢測到這些轉錄因子。

















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BCA蛋白定量試劑盒   貨號B5000

產品編號

W0013

R1090

R1091

產品名稱

Western 及 IP 細胞裂解液

RIPA 裂解液(中)

RIPA 裂解液(強)

有效裂解成分


1% Triton X-100

1% NP-40, 0.5% deoxycholate, 0.1% SDS

1% Triton X-100, 1% deoxycholate, 0.1% SDS

裂解強度

溫和

對膜蛋白的提取

一般

較好

很好

對胞漿蛋白的提取

很好

很好

很好

對核蛋白的提取

較好

較好

很好

胞漿磷酸化蛋白提取

很好

很好

很好

細胞核轉錄因子提取

很好

很好

很好

含蛋白酶抑制劑

含磷酸酯酶抑制劑

不同物種樣品兼容性

主要用途

WB, IP,co-IP

WB, IP

WB, IP



注意事項:

為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

本品僅用于實驗研究。






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