Agilent xCELLigence 細胞侵襲和遷移監(jiān)測分析系統(tǒng) 雙重用途 (DP) 儀器使用無標(biāo)記細胞阻抗連續(xù)測量細胞侵襲和遷移 (CIM) 并監(jiān)測細胞健康、行為和功能。

DP 儀器的三個板位/卡位可滿足三個獨立的 16 孔電子板，可以平行或彼此獨立地進行控制和監(jiān)測。這種靈活的孔板批量處理模式可實現(xiàn)多用戶處理，大大提高了分析效率。該儀器在標(biāo)準(zhǔn) CO2 細胞培養(yǎng)箱中運行，工作站位于培養(yǎng)箱外部。

使用 RTCA Software Pro 可輕松進行在線數(shù)據(jù)采集和離線數(shù)據(jù)分析，符合 FDA 21 CFR Part 11 法規(guī)要求。

特性

• xCELLigence RTCA DP 型號最多可運行三個獨立的電子 16 孔板（E-Plate 16 或 CIM-Plate 16）

• CIM-Plate 16 中的每個孔均為電子集成的 Boyden 小室，可以實時（以秒或分鐘為間隔）監(jiān)測細胞侵襲和遷移，無需外源標(biāo)記

• 使用 E-plate 16 的非侵入性和無標(biāo)記實時阻抗分析能以高靈敏度、準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性測量細胞健康、活力或?qū)μ幚淼姆磻?yīng)

• 以高時間分辨率（從數(shù)秒到數(shù)天）獲取連續(xù)數(shù)據(jù)

• 簡單的工作流程便于用戶將細胞添加到 E-plates 并在生理條件下開始動力學(xué)測量，盡可能縮短手動操作時間

• 直觀的 RTCA Software Pro 可分析實時數(shù)據(jù)，生成各種繪圖類型并自動計算細胞殺傷百分比、IC50 或 KT50 等參數(shù)

• RTCA Software Pro 符合 FDA 21  CFR Part 11 法規(guī)要求，確保電子數(shù)據(jù)可靠性

 工作原理

監(jiān)測細胞侵襲和遷移

xCELLigence RTCA DP 細胞侵襲和遷移監(jiān)測分析系統(tǒng)將連續(xù)的無標(biāo)記阻抗技術(shù)的優(yōu)點與經(jīng)典 Boyden 小室進行了結(jié)合。將細胞直接置于 CIM-Plate-16 上室的微多孔膜頂部（遷移檢測）或置于預(yù)先沉積在膜上的基底膜基質(zhì)和/或單層細胞的頂部（侵襲檢測）。當(dāng)細胞遷移并附著在下室的阻抗微電極上時，多孔膜上的阻抗傳感器可自動對其進行檢測。

在生理條件下實時檢測細胞行為

xCELLigence RTCA 儀器采用基于阻抗的技術(shù)，可在數(shù)秒至數(shù)天內(nèi)于標(biāo)準(zhǔn) CO2 細胞培養(yǎng)箱中連續(xù)自動檢測細胞的健康和行為。只需將細胞加至 E-Plate，即可開始實時監(jiān)測細胞數(shù)量、細胞增殖速率、細胞大小、細胞形態(tài)以及細胞-基質(zhì)粘附強度。xCELLigence RTCA DP 還能使用每個孔內(nèi)都含有電子集成 Boyden 小室的 CIM-Plate-16 檢測細胞侵襲和遷移 (CIM)。

細胞阻抗技術(shù)說明

這種高靈敏度實時細胞阻抗分析采用融合在 E-Plate 底面的微金電極，可非侵入性地檢測細胞特性。電極與溶液交界處存在的貼壁細胞會阻礙電子流動。阻抗的強弱取決于細胞數(shù)量、大小、形狀以及細胞-基質(zhì)的粘附強度。微金電極表面以及所采用的電勢 (22 mV) 均不會對細胞活力和細胞行為產(chǎn)生影響。

應(yīng)用

免疫細胞殺傷檢測

細胞侵襲和遷移在生物學(xué)的許多方面發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，包括傷口愈合和癌細胞轉(zhuǎn)移等過程。研究細胞侵襲和細胞遷移的主要困難之一在于缺乏可重現(xiàn)且有效的定量技術(shù)。xCELLigence RTCA DP 系統(tǒng)無需進行后端樣品處理，即可長時間收集遷移數(shù)據(jù) — 無需拆卸裝置并對細胞進行染色和計數(shù)，系統(tǒng)軟件將自動創(chuàng)建動力學(xué)遷移曲線。

細胞粘附檢測

原發(fā)性癌癥在腫瘤形成過程中將有數(shù)百萬個細胞脫落進入循環(huán)系統(tǒng)，稱為循環(huán)腫瘤細胞 (CTCs)。CTCs 可以重新粘附、擴散并向遠端器官轉(zhuǎn)移。使用 xCELLigence RTCA，可持續(xù)監(jiān)測不同類型細胞的粘附動力學(xué)，更深入地了解轉(zhuǎn)移的復(fù)雜性。實時定量評估細胞的粘附和伸展，無需使用熒光試劑或染料。

細胞屏障功能分析

細胞屏障功能由內(nèi)皮細胞和上皮細胞提供，在許多疾病狀態(tài)下會受到損害。內(nèi)皮細胞排列在血管和淋巴管的內(nèi)表面。上皮細胞形成我們身體的表面，作為保護身體免受外來分子傷害的屏障。基于阻抗的 xCELLigence RTCA 檢測方法是一種靈敏的定量方法，可替代溶質(zhì)滲透性檢測和跨內(nèi)皮細胞電阻 (TEER) 檢測等傳統(tǒng)方法，檢測屏障破壞。

免疫細胞殺傷檢測

常規(guī)的免疫細胞殺傷檢測耗時費力，需要用戶使用多種技術(shù)組合來采集多個時間點數(shù)據(jù)。相比之下，無標(biāo)記 xCELLigence RTCA 儀器提供了免疫細胞殺傷的全面信息，并近似模擬了體內(nèi)活性。以高靈敏度和高重現(xiàn)性直接實時檢測免疫細胞殺傷效力。這種簡單的高通量工作流程可深入研究細胞作用機制、連續(xù)殺傷和衰竭。

病毒病變效應(yīng)檢測

使用 Agilent xCELLigence RTCA 儀器實時準(zhǔn)確地檢測病毒的細胞病變效應(yīng) (CPE)，推進您的抗病毒治療或疫苗開發(fā)研究，無需進行費時費力的空斑實驗。在數(shù)分鐘至數(shù)天內(nèi)自動監(jiān)測病毒 CPE，大幅減少工作量和樣品的手動處理。檢測細胞增殖動力學(xué)，確定不同細胞接種密度下病毒感染的最佳時間點，評估工作流程中病毒介導(dǎo)的細胞病變。

細胞毒性分析

通過實時監(jiān)測細胞增殖、細胞大小或形態(tài)以及細胞-基質(zhì)粘附強度來確定藥物或化合物的細胞毒性作用。使用這種簡單且高通量的細胞毒性分析監(jiān)測長期細胞反應(yīng)的動力學(xué)。在不增加工作量的情況下，就細胞處理時間做出明智決策，并在多個時間點輕松生成劑量響應(yīng)曲線。

細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)檢測

G 蛋白偶聯(lián)受體 (GPCR)、 (RTK) 或核激素介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)往往會導(dǎo)致生化變化，影響存在的細胞數(shù)量、細胞大小/形態(tài)，以及細胞與孔板表面相互作用的緊密程度。使用 xCELLigence RTCA，您可以靈敏地捕捉到細胞大小、形態(tài)和增殖速率隨細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)事件的變化。這種無標(biāo)記的持續(xù)監(jiān)測可對處理后最初幾分鐘以及數(shù)天內(nèi)的細胞反應(yīng)進行定量評估。

干細胞檢測

干細胞研究幫助人們認識了疾病機理，有助于再生醫(yī)學(xué)的發(fā)展，并提供了一種測試新藥可靠性和有效性的替代方法。使用 xCELLigence RTCA 預(yù)測干細胞產(chǎn)品的功能并評估間充質(zhì)干細胞 (MSCs) 的變異性，克服細胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)中的挑戰(zhàn)。以更少的細胞大幅提高分析效率，持續(xù)檢測細胞數(shù)量、粘附強度和形態(tài)的綜合變化，確保各階段的一致性。