| 供貨周期 | 一周 | 應用領域 | 醫療衛生,環保,制藥/生物制藥,綜合 |
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| 描述 | Tofacitinib citrate是 JAK1/2/3 抑制劑，IC50 分別為1，20 和 112 nM。 | ||||||||||||
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| 相關類別 | 信號通路 >> 表觀遺傳學 >> JAK 信號通路 >> JAK/STAT信號通路 >> JAK 信號通路 >> 干細胞及 Wnt 通路 >> JAK 研究領域 >> 炎癥/免疫 | ||||||||||||
| 靶點 | JAK3:1 nM (IC50) JAK2:20 nM (IC50) JAK1:112 nM (IC50) Rock-II:3400 nM (IC50) Lck:3870 nM (IC50) | ||||||||||||
| 體外研究 | Tofacitinib（CP-690550）檸檬酸鹽可能在JAK3和JAK2處結合為2.2nM和5nM（Kd）。該報告包括在Camk1（Kd為5,000 nM），DCamkL3（Kd為4.5 nM），Mst2（Kd為4,300 nM），Pkn1（Kd為200 nM），Rps6ka2（Kin.Dom.2-C-）的Tofacitinib的額外結合。末端）（Kd為1,400 nM），Rps6ka6（Kin.Dom.2-C-末端）（Kd為1,200 nM），Snark（Kd為420 nM），Tnk1（Kd為640 nM）和Tyk2（Kd為620 nM） ）[1]。將K562，KCL22和THP-1細胞暴露于不同劑量的伊馬替尼（IMA）或JAK抑制劑72小時以量化酪氨酸激酶抑制劑（TKI）活性的作用。然后使用MTT測定評估細胞生長抑制。 IMA以濃度依賴性方式抑制K562和KCL22細胞而非THP-1細胞的增殖。 K562的IMA的IC50值為0.28μM，KCL22的IC50值為0.17μM。盡管單獨用托法替尼（TOF）或Ruxolitinib（RUX）治療不能抑制細胞增殖，但Tofacitinib和Ruxolitinib均使K562和KCL22對IMA更敏感[4]。 | ||||||||||||
| 體內研究 | 與PEG處理的對照小鼠相比，用Tofacitinib處理的動物顯示出顯著更低的抗藥物抗體（ADA）產生（初次免疫后5周，p <0.01，n = 8）。此外，ADA在第28天最早可檢測到。與第21天至第35天相比，SS1P的滴度相差1000至200倍。與SS1P相比，注射了匙孔血藍蛋白（KLH）的小鼠產生更快的抗體反應。然而，與對照相比，Tofacitinib的施用降低了抗KLH滴度（第21天p <0.05，第28天p <0.01，n = 5）。從第21天到第28天，滴度的降低分別為5000到250倍[2]。基于之前的劑量反應研究，選擇每日劑量為6.2 mg / kg的托法替尼，以提供80％的后爪體積抑制和能夠抑制JAK1和JAK3信號通路> 4小時的血漿暴露[3]。 | ||||||||||||
| 溶解度 | 體外： DMSO：≥122.5mg / mL（242.82 mM） H 2 O：5 mg / mL（9.91 mM;需要超聲波和加溫） * “≥”表示可溶，但飽和度未知。 | ||||||||||||
| 儲備液 |
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| 激酶實驗 | 通過與專有標簽融合的所選激酶的競爭結合測定記錄激酶活性。在存在和不存在測試化合物（例如，托法替尼）的情況下，激酶量與固定的活性位點定向配體結合的測量提供了對配體結合的DMSO對照的％。選擇0到10之間的活動用于Kd測定。樹形圖表示由名為PhyloChem [1]的內部可視化工具生成。 | ||||||||||||
| 細胞實驗 | 使用MTT進行細胞存活測定。簡而言之，將K562，KCL22和THP-1細胞（1×10 5個細胞/孔）接種到96孔微孔板上，并用或不用IMA（0.06-1.0μM）和/或托法替尼（10-1,000nM）或RUX處理。 （10-1,000nM）在37℃，濕潤的5％（v / v）CO 2氣氛中72小時。然后將培養基（200μL）與10μL的5mg / ml MTT溶液在37℃下孵育4小時。在352g離心5分鐘后，除去培養基，向各孔中加入100μLDMSO以溶解甲..使用酶標儀在570nm處測量吸光度。結果表示為百分比[4]。 | ||||||||||||
| 動物實驗 | 小鼠[2]使用雌性BALB / c小鼠（6-8周齡）。小鼠通過滲透泵輸注（0.25μL/小時，28天）接受PEG300（100mg / mL）或單獨載體（PEG300）中的Tofacitinib。免疫前4天，將小鼠麻醉并將其背部表面剃毛。在背部做一厘米的切口以形成皮下袋并插入泵。切口部位用傷口夾閉合。從第0天開始每周（ip）注射小鼠SS1P重組免疫毒素（RIT;5μg/小鼠）;對照小鼠僅接受鹽水注射。在SS1P或載體免疫前每周，抽取50μL血液以獲得血清樣品。將血清儲存在-80℃直至分析。大鼠[3]在雌性Lewis大鼠中誘導佐劑誘導的關節炎（AIA）。根據后爪體積隨機分配大鼠并將其分配給Tofacitinib或載體治療方案。每個治療組7-8只大鼠組和正常幼稚大鼠（每組n = 4）在開始治療后4小時，4天或7天（分別在免疫后第16,20和23天） 。每天一次口服給予載體或托法替尼（6.2mg / kg），在免疫后第16天開始并持續至第23天。在治療開始后第4天和第7天（分別在免疫后第20天和第23天）重新評估爪體積。 ）。對于微型計算機斷層掃描（微CT）成像，以及爪組織中的抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色，在單獨的Lewis大鼠隊列中誘導AIA。 | ||||||||||||
| 存儲 |
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| 運輸 | 室溫;可能會有所不同 | ||||||||||||
| SMILES | O=C(CC#N)N1C[C@H](N(C2=C3C(NC=C3)=NC=N2)C)[C@H](C)CC1.O=C(CC(C(O)=O)(O)CC(O)=O)O | ||||||||||||
| 參考文獻 | [1]. Jiang JK, et al. Examining the chirality, conformation and selective kinase inhibition of 3-((3R,4R)-4-methyl-3-(methyl(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)amino)piperidin-1-yl)-3-oxopropanenitrile (CP-690,550). J Med Chem. 2008 Dec 25;51(24):8012-8. [2]. Onda M, et al. Tofacitinib suppresses antibody responses to protein therapeutics in murine hosts. J Immunol. 2014 Jul 1;193(1):48-55. [3]. LaBranche TP, et al. JAK inhibition with tofacitinib suppresses arthritic joint structural damage through decreased RANKL production. Arthritis Rheum. 2012 Nov;64(11):3531-42. [4]. Yagi K, et al. Pharmacological inhibition of JAK3 enhances the antitumor activity of imatinib in human chronic myeloid leukemia. Eur J Pharmacol. 2018 Apr 15;825:28-33. | ||||||||||||
| 分子式 | C22H28N6O8 |
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| 分子量 | 504.493 |
| 精確質量 | 504.196869 |
| PSA | 221.04000 |
| LogP | 0.23418 |
| 外觀性狀 | white to beige |
| 儲存條件 | room temp |
| 水溶解性 | DMSO: soluble5mg/mL (clear solution; warmed) |
1.1 產品標識符 : Tofacitinib citrate 產品名稱 1.2 鑒別的其他方法 CP-690550-10 (3R,4R)-4-Methyl-3-(methyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamino)-?-oxo-1-piperidinepropanenitrile citrate; tasocitinib citrate 3-[(3R,4R)-4-methyl-3-[methyl-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)amino]piperidin-1-yl]-3-oxopropanenitrile citrate 1.3 有關的確定了的物質或混合物的用途和建議不適合的用途 僅供科研用途，不作為藥物、家庭備用藥或其它用途。 |
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