成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

官方微信|手機版

產品展廳

產品求購企業資訊會展

發布詢價單

化工儀器網>產品展廳>分析儀器>其它分析儀器>其它通用分析>4dcell 細胞收縮力測試分析儀

分享
舉報 評價

4dcell 細胞收縮力測試分析儀

具體成交價以合同協議為準

聯系方式:曹茜查看聯系方式

聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!


世聯博研(北京)科技有限公司(Bio Excellence International Tech Co.,Ltd),簡稱世聯博研(Bioexcellence),是一家國際前沿生命科學設備、耗材、試劑代理銷售與技術服務企業,于2010年成立于北京。

     世聯博研(Bioexcellence)意即聯合世界生命科學界的博士研究生,通過他們向廠商、用戶傳遞專業、實效的生命科學產品與服務,把包括生物力學、3D生物打印、再生醫學、生物醫學工程、微流控&組織器官芯片、細胞微環境在內的等生命科學國際前沿產品與技術引進中國,為中國科研學者提供專業、實效的儀器設備、耗材、試劑以及科研技術服務一站式解決方案。


世聯博研新引進美國TIRF公司全內反射熒光顯微鏡交鑰匙工作站

美國TIRF公司全內反射熒光顯微鏡交鑰匙工作站

——類型齊全:物鏡式、棱鏡型和光導型全內反射顯微鏡,搭配靈活、經濟

該TIRF全內反射熒光顯微鏡工作站可靈活由基于棱鏡式、光導式和物鏡式的全內反射熒光顯微鏡,無限物鏡20倍、40倍、60倍或100倍、微光CMOS相機和多色光纖耦合照明器技術優勢整合而成。 
●多種配置方案:棱鏡、光導和物鏡式任選和靈活組合 
●有完整工作站式和已有顯微鏡升級配件式
●有包括開放式灌注室和封閉式流動室、可選的電化學和介電泳控制裝置等等 
●支持TIRF流動系統灌流
●支持按需定制 

基于棱鏡、光導和物鏡的光學方案是用于TIRF顯微分析儀的三種主流幾何構型。每種幾構型的優勢和其局限性,如下:

1)基于棱鏡的方案提供了醉佳的信噪比,然而,在倒置顯微鏡上使用開放式灌注室的方案中很難實施。
2)基于光導的幾何結構具有出色的使用靈活性和出色的信噪比,可與倒置顯微鏡上的開放式灌注室一起使用,并且與干式、水浸式和油浸式物鏡兼容。然而,它需要更大的光功率來獲得同等強度的消逝波。
3)基于目鏡的方案收集的發射熒光比例醉大,但TIRF效應的質量卻大打折扣,因為激發光與發射光共享同一光學通道,導致大量 (~15%) 的雜散光也激發大部分樣品,因而劣化了由目鏡TIRF 產生的 TIRF 效應。

TIRF全內反射熒光顯微鏡交鑰匙工作站充分靈活整合棱鏡、光導和物鏡型的三種類型TIRF的優勢,有多種靈活的配置可供選擇,包括開放式灌注室和封閉式流過室、選配的電化學和介電泳控制。充分體現了全內反射熒光顯微鏡的高靈敏高分辨優勢。


也支持為您單獨提供棱鏡、光導和物鏡 TIRF單元熒光顯微鏡的附加配件,升級您已有的顯微鏡為全內反射顯微分析系統。

 

靈活組合方案可現實醉佳的信噪比、在倒置顯微鏡上使用開放式灌注室、出色的使用靈活性和出色的信噪比,可與干式、水浸式和油浸式物鏡兼容.收集的發射熒光比例醉大,TIRF效應的質量不打折扣,可根據根據實際需要來選擇配置。

 

性價比優于尼康、奧林巴斯、蔡司和徠卡品牌:

出于多種原因,尼康、奧林巴斯、蔡司和徠卡一直在說僅依賴昂貴的高NA目標的物鏡式全內反射熒光顯微鏡。一個典型的物鏡式全內反射熒光顯微鏡大約要花費8萬美元或更多。具有諷刺意味的是,就全內反射熒光顯微鏡而言,高價格并不意味著高質量。文獻中已經很好地記錄了倏逝波與理論預測的指數衰減的大偏差。人們應該考慮到這樣一個事實,即研究人員不愿意公布關于失敗嘗試的負面結果。在許多情況下,雜散光的強度與倏逝波的強度相當;物鏡式全內反射熒光顯微鏡用戶經常處理被超過50%的雜散光污染的倏逝波。

我們提供美國全內反射熒光顯微鏡工作站可以根據您需求,靈活組合棱鏡式全內反射熒光顯微鏡、光導式全內反射熒光顯微鏡、物鏡式全內反射熒光顯微鏡,很好地解決了這一問題。

廣泛應用:

我們提供美國全內反射熒光顯微鏡是眾多生命科學領域的強大分析工具,包括單分子檢測、超分辨率顯微鏡、細胞生物學、用于分子診斷的實時微陣列、生物測定方法開發、納米工程和藥物篩選。


 

脂筏動力學



  • ●細胞表面圖象的觀察:細胞膜表面結構、細胞表層的接觸、膜表面動力學/蛋白質定位。

  • ●單分子觀察及其操作:肌球蛋白、肌動蛋白與Cy3標記ATP。

  • ●細胞膜表面運動:如泡吞、泡吐現象,泡外分泌現象。 

  • ●細胞膜鈣火花現象的觀察,離子通道監視。

  • ●分子馬達研究:旋轉的馬達、細胞骨架蛋白、聚合體、G蛋白、環狀蛋白、核苷酸馬達。

  • ●單分子檢測,包括smFRET

  • ●超分辨率顯微拷貝

  • ●細胞膜研究

  • ●分子診斷學

  • ●生物分子相互作用分析

  • ●監測生物分子相互作用的實時動力學

  • ●實時TIRF微陣列

  • ●組合的脫氧核糖核酸、核糖核酸、蛋白質和代謝物陣列

  • ●蛋白質-蛋白質和蛋白質-DNA相互作用的研究

  • ●表面支撐膜的研究

  • ●脂筏動力學研究

  • ●納米工程

  • ●生物測定開發等…

除了在生物領域外,在化學領域等對于化學分子結構觀察中也有很好的應用。

便攜式TIRF生物傳感器:

手持式全內反射熒光顯微鏡,手持式TIRF

是用于即時分子診斷的*自主(小鞋盒尺寸)設備。該便攜式TIRF生物傳感器能夠執行高度多重分析 - 同時檢測從幾到幾百個 DNA、RNA、蛋白質和代謝物標記。響應速度在幾秒到幾分鐘。

便攜式TIRF生物傳感器無需或只需極少的樣品制備。全血、細針抽吸活檢的裂解物或組織的勻漿標本可以在少的準備程序后進行分析。便攜式TIRF生物傳感器測量微陣列響應的實時動力學,構建傳感圖并得出 k-on 和 k-off 速率常數。該傳感器配備了印在 TIRF 傳感器芯片表面的內部標準、陽性和陰性對照。便攜式TIRF生物傳感器使用二氧化硅、玻璃和塑料顯微鏡載玻片(1 英寸 x3 英寸 x 1 毫米)作為 TIRF 光導。 便攜式TIRF生物傳感器還支持電化學發光(ECL)、生物發光、基于珠子和溶液相熒光檢測方法。該傳感器非常適合用于表面固定凝膠封裝的生物測定的實時動力學分析。便攜式TIRF生物傳感器自定義配置包括多色照明器、溫度和電化學控制。

 


     世聯博研有10多年的國際前沿科研儀器代理銷售經驗,已成功與國際生命科學領域近50多家的科研產品制造商以及1300多家中國三甲醫院、2100多家科研院所、600多家高校、400多家檢驗檢疫等用戶單位建立了良好誠信的長期合作關系,正以不斷引進國際前沿生命科學領域科研產品、專業和規模化的營銷渠道、高效安全的國際聯運、快捷的海關清關報關和專業人性化售前售后的服務模式,實現了國際廠家與中國科研用戶的對接、落地實施,實現合作伙伴資源共享,共同發展,世聯博研(Bioexcellence)是個開放熱情的企業單位,熱烈歡迎國內外相關單位人士洽談、合作,共謀發展。
世聯博研的客戶范圍:
科研院所單位、生物醫學科研高校、醫院基礎科研單位等。
世聯博研公司代理的品牌具有:
1)近10年長期穩定的貨源
2)以生物力學、細胞力學、細胞生物分子學、生物醫學組織工程、生物材料學為主,兼顧其他相關產品線
3)提供專業產品培訓和銷售培訓
4)良好的技術支持
5)已成交老客戶考證
6)每年新增的貨源。


 

 

細胞應力加載儀,3細胞打印機,NanoTweezer新型激光光鑷系統,PicoTwist磁鑷,美國NeuroIndx品牌Kuiqpick單細胞捕獲切割系統

應用領域 醫療衛生,環保,生物產業


細胞收縮力測試分析儀


高通量細胞收縮測試裝置

典型應用:

1、心肌細胞成熟度測定
功能性 iPSC 誘導的心肌細胞纖維

2、牽引力測定
細胞在基質上施加的力的量化

3、Durotaxis 和 haptotaxis 測定
控制基材剛度

4、3D CM 成熟度測定
評估 iPSC-CM 的跳動

5、單CM收縮力
單個心肌細胞搏動力的量化





世聯博研北京公司測試方案:

一、細胞收縮力高通量檢測多孔板-24、96、384孔板:


圖1:原理圖:

1.1)細胞收縮力測試24孔板

1.2)細胞收縮力測試96孔板

1.3)細胞收縮力測試384孔板



細胞收縮力測試分析儀   牽引力微柱陣列

圖案的*微孔板,上面有100,000多個均勻分布的X或+形的具有粘性蛋白質微圖案,細胞沉降并附著在其上,嵌入板中的X具有彈性,因此每當細胞收縮時它們就會收縮。 X帶有分子標記,可以發出熒光,從而可以成像和量化縮小的形狀。


可以成像和定量,因此研究人員可以將X或十字架的變形與單個細胞或成千上萬個細胞的一定量的力相關聯。該技術還為研究人員提供了查看單個細胞鈣反應以及它們與細胞強度之間的關系的能力。

該技術也可以用于藥物發現。研究人員可以快速,輕松地測試不同的治療分子,以了解它們如何影響細胞力以及是否可以糾正任何潛在的力問題。

在具有可控剛度的彈性薄膜中嵌入用戶設計的粘合劑和熒光微圖案,形成非常密集但均勻的陣列(> 120微米/每平方毫米)。100000個患者來源的單細胞(地從疾病起源的人體組織中獲得)獨立地定位并粘附在微圖案上(每個微圖案一個細胞),它們對該微圖案施加牽引力并明顯改變其形狀,從而能夠在*的吞吐量下對細胞收縮性進行直觀的基于圖像的評估。

1)熒光彈性可收縮表面的微圖案化

—在具有可控剛度的彈性薄膜中嵌入用戶設計的粘合劑和熒光微圖案,形成非常密集但均勻的陣列(> 120微米/每平方毫米)。100000個患者來源的單細胞(地從疾病起源的人體組織中獲得)獨立地定位并粘附在微圖案上(每個微圖案一個細胞),它們對該微圖案施加牽引力并明顯改變其形狀,從而能夠在*的吞吐量下對細胞收縮性進行直觀的基于圖像的評估。



2)基于圖像的受控單細胞收縮性的動力學可視化

—例如,384孔板內的每個附著細胞的微圖案在延長的時間內以精細的時間分辨率被獨立監控,以直接觀察收縮行為的全部范圍,從緊張性收縮到誘導性收縮或松弛,以及任一效應的作用窗口。選擇“x”形微圖案以小化細胞-基底接觸面積,同時大化細胞擴散面積,從而在不同位置產生放大和集中的力。由于每個微圖案都與其他微圖案機械分離,粘附的細胞不會將應變傳遞給相鄰的微圖案,從而確保對群體中每個單個細胞的收縮力進行可靠的評估。



3)單細胞收縮性的自動化和直觀的圖像分析

—基于該方法的檢測產生直觀、明確的收縮信號——提供直接的圖像分析,以從成像群體中的每個單細胞獲得定量和可靠的數據。


可以同時獲取1000多個均勻圖案的單細胞的強大的收縮性數據,并與96-和384孔板格式無縫地集成,以促進大規模的藥物篩選



二、細胞牽引力顯微鏡及微柱陣列介紹


圖4:細胞牽引力顯微鏡


圖5:細胞微柱陣列,可定制剛度、大小、形狀和間距。


細胞微柱陣列介紹

特點:

將細胞培養在具有形貌特征,微柱且具有特定剛度的基質上。 可以以高密度分布微柱以創建細胞施加的力的圖(牽引力顯微鏡),或者它們的大小和排列可以具有細胞大小,因此可用于測量單個細胞的整體收縮力

●PDMS微柱的偏轉可實現力感測

●PDMS微柱的剛度由其尺寸(Durotaxis)控制

●提供幾種微柱幾何形狀和布置

●單細胞力作圖(牽引力顯微鏡)

●可控的生物功能化

●適應任何細胞培養底物(從培養皿到96孔板)

●與高分辨率光學顯微鏡系統兼容



典型應用:

>單心肌細胞收縮力測定:定量單心肌細胞的搏動力

>牽引力測定:定量細胞在基質上施加的力



可訂購的產品

1、圓形PDMS微柱10 mm蓋玻片:

標準尺寸:24 mm圓形蓋玻片(約170μm厚度)
設計:直徑為5 ?m; 中心到中心的距離為7 ?m
三種高度可供選擇:2 ?m,6 ?m和12 ?m


2、帶狀柱子的蓋玻片:


3、方形微柱蓋玻片

設計:直徑7.5 ?m; 微柱之間的距離為20 ?m

三種高度可供選擇:2 ?m,6 ?m和12 ?m



細胞在具有特定剛度的包含地形特征、微柱的基質上培養。微柱可以高密度分布以創建細胞施加的力圖(牽引力顯微鏡),或者它們的大小和排列可以是細胞大小,因此可用于測量單個細胞的整體收縮力。



4. 可定制的直徑、高度、間距

我們提供帶有微型PDMS微柱的10毫米蓋玻片,用于細胞培養和力評估。

不同的支柱設計和布置適合各種應用,例如牽引力顯微鏡,收縮力和旋轉軸。

通過測量PDMS微柱響應于細胞施加的力的撓度來進行力評估。

>多種設計可供選擇
可用高密度和低密度微柱以及不同縱橫比的基板。
>兼容高分辨率顯微鏡。
易于觀察細胞及其對微柱變形的影響


典型應用:

>單心肌細胞收縮力測定:定量單心肌細胞的搏動力

>牽引力測定:定量細胞在基質上施加的力



三維細胞培養的出現是為了解決二維細胞培養的局限性 。這些 3D 細胞培養物用于模仿天然細胞外基質 (ECM),這是一種高度水合的膠原蛋白和彈性纖維網絡,嵌入在糖胺聚糖、蛋白聚糖和糖蛋白的凝膠狀材料中 [5]。它們可以使用基質或支架形式的天然和合成材料制造,以更好地代表細胞環境的空間組織 ,許多細胞的行為都依賴于此,從而減少細胞培養物和原生生物環境。因此,3D 細胞培養已成為提高細胞研究相關性的重要手段 。

近幾十年來微流體技術的出現進一步擴大了我們改進細胞培養的能力,更地控制了局部細胞微環境 。微流體是一個涉及在微米級幾何形狀中操縱少量流體的領域,通常在基于硅的芯片上,它為細胞研究帶來了許多好處,例如對微環境進行更大的空間和時間控制  ,能夠使用更小的試劑體積,具有更短的反應時間 ,并且具有更大的細胞處理整合潛力 。微流控技術還產生了細胞限制潛力,由此可以使少量細胞甚至單個細胞發生機械變形 或簡單地隔離 ,



細胞力產生和力傳遞綜合測量分析系統


shouquan.jpg

1、背景和解決方案:

       在生理和病理條件下,細胞本身產生的或細胞外基質 (ECM) 通過粘著斑 (FA) 和粘附連接 (AJ) 傳遞的機械力已知在調節各種細胞行為中發揮重要作用。

細胞胞力的產生力的傳遞:

對于許多生物過程至關重要,量化通過基于E-鈣粘蛋白的粘附連接施加的細胞-細胞和細胞內力,將在生物學研究領域闡明與機械力響應相關的細胞功能方面發揮基礎性作用,

該系統為理解生物力學力在單個細胞、多細胞以及細胞-細胞/細胞-ECM 界面上的作用的提供了新方法,將為革新再生醫學、疾病建模和藥物發現的突破性技術打開大門,

闡明了細胞遷移、增殖、分化、重塑和機械感知其微環境的機制的許多方面。

2、該系統綜述:

該系統支持基于微柱陣列法、FLECS熒光彈性基底微圖案法、集成熒光微珠嵌入聚丙烯酰胺凝膠法、PDMS合規的薄硅膜法,集優棄劣進行力生成和應力傳遞分析,可以2D細 胞,也可以3D細胞嵌入水凝膠中,并結合時間依賴性 (4D)的細胞內源力產生與力傳遞量化分析實驗。可用于單個細胞、多細胞之間、細胞集落和融合細胞層(cell sheet)中的力生成和應力傳遞分析,為理解生物力在單個細胞、細胞集落、細胞-細胞/細胞-ECM界面上的作用提供了新方法,將為革新再生醫學、疾病建模和藥物發現的突破性技術打 開大門,闡明了細胞遷移、增殖、分化、重塑和機械感知其微環境的機制的許多方面,對于深刻理解許多生物過程至關重要。

該系統解決了從具有已知彈性的粘性基底測量的細胞力引起的變形重建細胞基質牽引力和細胞間和細胞內應力的逆問題。除了應力和力生成的標準測量之外,

還可以進行包括線性張力測量(一種專門用于細胞邊界的力傳遞測量),允許用戶設置所必要的分析參數,選擇感興趣的區域,檢查輸入參數和中間結果,

并計算描述力、應力及其分布的各種參數,允許非用戶對此類實驗進行全面評估,可讓您快速分析可視化大型數據集。

可選配時差顯微鏡活細胞工作站,為顯微鏡提供類似培養箱的氣體溫度濕度控制;

可選的共聚焦超高分辨率TIRF顯微鏡

2.2、測試方法:

  • 2.2.1、細胞微柱陣列:

    細胞主要黏附于與基底垂直微柱的上面,可以直接根據微柱的彎曲變形程度與方向測定與細胞接觸點牽引力的大小與方向。

    2.2.2、熒光微珠嵌入聚丙烯酰胺凝膠:

    通過培養在具已知彈性軟基底(聚丙烯酰胺(PA)膠),細胞收縮過程中對基底產生的牽引力使基底產生變形,這種變形反映到熒光微珠的運動;用熒光顯微鏡采集熒光微珠的運動信息,經圖像處理后,得到基底的應變信息,然后通過一定的力學模型,定量反演出細胞的牽引力;細胞收縮或遷移過程中各個時刻的力分布就可以可視化在計算機屏幕上

    2.2.3、熒光彈性可收縮表面微圖案化多孔板高通量細胞收縮力檢測多孔板-24、96、384孔板:

    該可高通量檢測細胞收縮力的多孔板是軟膜底嵌有熒光微圖案的du特微孔板,上面有100,000多個均勻分布的X或+形的具有粘性蛋白質微圖案,細胞沉降并附著在其上,嵌入板中的X具有彈性,因此每當細胞收縮時它們就會收縮。 X帶有分子標記,可以發出熒光,從而可以成像和量化縮小的形狀

    2.2.4、合規PMDS基底多孔板:

    采用軟彈性基底,通過細胞與彈性基底相互作用引起的基底變形來測定或計算細胞牽引力

    可定制剛度0.1kPa 至 100 kPa 的楊氏彈性模量、蛋白質涂層

  • 2.3、適用樣品:

    2D單個細胞、3D凝膠包埋的細胞、細胞集落和融合細胞層中的力生成和應力分析,細胞收縮力、細胞之間相互用力、細胞與ECM之間相互用力、跨細胞邊界作用力、平均法向應力和剪切應力

  • 2.4、典型測試應用:


有許多不同的方法可以測量力的產生和應力。在這里,您可以找到可以使用該程序計算的數量的概覽。

2.4.1、基材變形

zui簡單的方法是總結細胞附著的基底表面的變形。變形取決于基材的機械性能。

2.4.2、應變能

QQ截圖20230327101420.jpg

2.4.3、收縮力

收縮力定義為牽引力向一個點(稱為力中心)的投影之和。因此,如果力都已經指向一個中心點,則收縮性很高。局部相反的力和不指向力震中的力對收縮性沒有貢獻。能夠以力似乎源自單個點的方式協調其力產生的細胞或細胞群可以獲得高收縮性,同時消耗相對少量的應變能。

這在圖13中進一步說明。案例 A 代表具有兩個具有高度協調力生成的細胞的細胞集落,案例 B 代表具有協調性的細胞。在情況 B 中,每個細胞自行產生收縮力。因此,如果我們假設情況 A 和 B 中的應變能相等,則情況 B 的收縮性較低。

收縮力圖示

綜上所述:應變能是總力產生的量度,而收縮性是協調力產生的量度。

2.4.4、平均法向應力和剪切應力

壓力描述了在細胞或細胞片內部傳遞的力。對于細胞表中的任何給定點,應力由具有 4 個分量的張量定義。如圖 14所示,每個分量代表將作用于從細胞片切出的正方形邊緣的力

QQ截圖20230327101406.jpg

我們可以區分兩種類型的應力:剪切應力,一種平行于該正方形邊緣作用的力,以及法向應力,一種垂直于該正方形邊緣作用的力。由于幾何原因,應力張量的兩個剪切分量必須相同。普通組件不是這種情況。由于法向應力是否主要來自 x 或 y 方向對我們的分析沒有意義,因此計算兩個分量的平均值更有用。這留下了兩個應力:剪應力和平均法向應力。這些壓力可以在整個細胞集落區域進行平均。

2.4.5、應力分布

應力分布可以用變異系數 (CV) 來描述,即用平均法向應力或剪切應力的平均值歸一化的標準偏差。

2.4.6、跨細胞邊界作用的力

如上所述,應力張量可用于計算作用于細胞集落邊界的力。這種力稱為線張力,有一個直接的解釋:想象一下,您實際上要沿著兩個細胞之間的邊界切割細胞片。如果細胞繼續產生力,則該切口的邊緣會漂移開或開始重疊,因為您剛剛切割了將兩個邊緣固定在一起的材料。為了將兩個邊緣保持在切割之前的位置,您需要在邊緣施加一個力。這個力,由切割長度歸一化,是線張力。

線張力是具有 x 和 y 分量的向量。與應力類似,它可以分為剪切分量(平行于切口作用的力)和法向分量(垂直于切口作用的力)。兩者都有助于線張力的大小(線張力矢量的長度)。

        使用該系統計算細胞間應力,以獲得面內二維應力張量。簡而言之,應用牛頓定律要求的直接力平衡,為我們提供單層內的二維應力張量,通過旋轉單層內每個點的坐標系此外,在單層內的每個點,我們計算了平均正常細胞間應力 (σ max + σ min )/2 和zui大剪切細胞間應力 (σ max -σ min )/2

我們的平臺兼容2D/3D/4D模式,支持單細胞、融合單層細胞以及介于兩者之間的細胞。可按需定制,包括孔格式、模量、珠熒光、玻璃厚度和分析軟件的定制。我們可以提供任何組合,制造您想要的,并且樂于為您的挑戰創新解決方案。

QQ截圖20230325221818.jpg微信圖片_20230326233419.jpg
























































化工儀器網

采購商登錄
記住賬號    找回密碼
沒有賬號?免費注冊

提示

×

*您想獲取產品的資料:

以上可多選,勾選其他,可自行輸入要求

個人信息:

溫馨提示

該企業已關閉在線交流功能

主站蜘蛛池模板: 清冷受被CAO的合不拢| 亚洲区视频在线观看| 色情性黄10060片免费看小说| 日本黄片在线免费观看| 精品久久久久久久91| 91在线视频观看国产| 91精品国产手机在线观看| 手机在线看片日韩欧美| 国产午夜亚洲精品一区| 中文字幕在线日韩精品| 国产AV麻豆MAG剧集| 黑料网-独家爆料破解版| 欧美日韩经典一区二区三区| 亚洲AV国产精品无码A片APP| 熟女人妻久久中文字幕一二区| 99好久被狂躁A片视频无码| 亚洲精品欧美日韩在线| 国产日韩a在线观看| 91精品国产综合久久精品| 无套内谢孕妇毛片免费看| 日本熟妇乱人免费视频| 日韩一卡2卡3卡4卡新区亚洲| 国产精品久久久久久久密桃| 18禁黄网站男男禁片免费观看| 日韩欧美一区二区三区免费观看| 日韩中文字幕系列| 九一九色国产| 天天躁人人躁人人躁狂躁| 免费在线视频一区| 日韩欧美在线亚洲| 无码粉嫩小泬无套在线观看A片| 嗯啊灌满了啊太深了H视频免费看| 另类人妻中文字幕| 麻豆传煤网站免费入口ios| 国产免费又色又爽又黄的小说| 亚洲精品无码高潮喷水A片软件| 18禁国产精品久久久久久久| 成人国产精品一区二区免费看| 欧美一级久久久久久久大片| 久久久久精品国产14女子| 团地妻快播|