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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>生化試劑>蛋白質/多肽>AP12L025 BCA蛋白定量試劑盒

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AP12L025 BCA蛋白定量試劑盒

參考價198.00
具體成交價以合同協議為準
規格
500T198.00元99 件 可售

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  公司前身為上海李記生物科技有限公司,成立于2015年。和元李記在2023年由和元生物和李記生物合資成立,是集研發、生產、銷售為一體的國產生物試劑公司,專注于生命科學和生物技術領域,致力于為客戶提供技術優秀 、方便易用、經濟高效的產品,產品范圍包括:細胞生物學、分子生物學、免疫學和生物化學相關的實驗試劑及試劑盒。

  目前在全國40余座城市均有授權代理;直接服務終端超千家,涵蓋CRO、藥企、高校、醫院和科研院所;李記產品已幫助客戶發表數百篇SCI,多篇CNS。

  優勢產品:蛋白Marker、EZ Trans細胞轉染試劑、CCK-8、支原體快速檢測試劑盒、核酸染料(GelRed/GelGreen)、EZ Protein any KD PAGE蛋白電泳試劑盒、熒光染料(Alexa Fluor 488, 555, 647,CY3, cy5)、胎牛血清、細胞凋亡檢測試劑盒等。

胎牛血清,轉染試劑(高效),凍存液(普通),cck-8,1640培養基,PBS液體,凋亡試劑盒,熒光素鉀鹽,蛋白Mark,發光液(超敏),快速封閉

供貨周期 現貨

BCA蛋白定量試劑盒

產品描述
BCA (Bicinchoninic acid) 法是目前應用比較廣泛的蛋白質濃度測定方法。基于雙縮脲反應,即在堿性環境下蛋白質將Cu2+還原成Cu+,Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡合物,在562 nm處有高的吸光值,該反應產物的量與蛋白質濃度成正比。測定其在562 nm處的吸光值,并與標準曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。該方法快速靈敏、穩定可靠且對不同種類蛋白質變異系數很小。試劑盒中提供了濃度穩定的蛋白標準品用于制作標準曲線。
BCA 蛋白定量試劑盒可用于試管法檢測,也可用于微孔板法檢測。試管法需較大量蛋白樣品(100 μL)和工作液(2 mL),蛋白樣品與 BCA 工作液的比率為1:20(v/v),蛋白質測定范圍為20-2000 μg/mL,采用加強法可以檢測到 5 μg/mL;微孔板法操作簡單方便,僅需少量(10-25 μL)的蛋白樣品和工作液(200 μL),蛋白樣品與工作液的比率為1:20(v/v)或者1:8(v/v),蛋白質測定范圍為 20-2000 μg/mL,采用加強法可以檢測到 5 μg/mL。
我司提供的 BCA 蛋白濃度檢測試劑盒,比色皿法50次,酶標法500次。
訂購信息

產品名稱貨號規格
BCA蛋白定量試劑盒AP12L025500T

產品組分

貨號組分規格
AP12L025BCA 試劑 A100mL
BCA 試劑 B5mL
BSA 標準品 2 mg/mL2*1mL

運輸與保存
常溫運輸。常溫保存,有效期12個月。
使用方法
一、配制標準品和工作液

  1. 配制 BSA 標準品體系(線性范圍20-2000 μg/mL或者5-250μg /mL標準品制備各2種配置方法,請根據習慣選用恰當方式)。【注】:BSA 標準品濃度為2 mg/mL,稀釋液為蛋白樣品的溶解液,原則上蛋白樣品在什么溶液中,標準品也宜用什么溶液稀釋。但也可用水或 1 X PBS 進行稀釋。

BSA 標準品體系配制表(配制后可放置于4℃ 冰箱多次使用)
表1.微孔板檢測BSA 標準品體系配制(線性范圍 20-2000 μg/mL)配置方法一

Vial稀釋液體積(μL)BSA標準品體積(μL)BSA終濃度(μg/mL)
A01002000
B25751500
C50501000
D8350750
E7525500
F14020250
G15010125
H158225
I10000=Blank

表2.微孔板檢測BSA 標準品體系配制(線性范圍 20-2000 μg/mL)配置方法二

Vial稀釋液體積(μL)BSA標準品體積(μL)BSA終濃度(μg/mL)
A0BSA 標準液1002000
B25BSA 標準液751500
C65BSA 標準液651000
D35Vial B 35750
E65Vial C 65500
F65Vial E 65250
G65Vial F 65125
H80Vial G 2025
I8000=Blank

表3.BSA標準品體系(微孔板檢測,線性范圍 5-250μg /mL)配置方法一

Vial稀釋液體積(μL)BSA標準品體積(μL)BSA終濃度(μg/mL)
A7010250
B755125
C78250
D79125
E39915
F8000

表4.BSA標準品體系(微孔板檢測,線性范圍 5-250μg /mL)配置方法二

Vial稀釋液體積(μL)BSA標準品體積(μL)BSA終濃度(μg/mL)
A70BSA 標準液10250
B40Vial A 40125
C45Vial B 3050
D40Vial C 4025
E40Vial D 105
F4000


2. 配制 BCA工作液
(1) 計算所需要的總BCA 工作液體積。總BCA工作液體積=(標準品數量+待測樣品數量)x重復數x每個樣品所需要的BCA 工作液。【注】:試管法檢測時每個樣品加 2.0 mL BCA 工作液,微孔板檢測每個樣品加200 μL BCA 工作液。
(2) 配制BCA工作液:50 體積的BCA 試劑 A 中加入1 體積的BCA 試劑B(A:B=50:1),充分混勻。【注】:BCA工作液裝入密封容器內,室溫條件24h 穩定。

二、檢測方法
1. 試管檢測方法(樣品:BCA工作液=1:20)
(1) 各取100 μL 標準品和待測樣品加入到反應管中。
(2) 每管加入2.0 mL BCA 工作液,混勻。根據待測樣品的濃度范圍選擇孵育時間和溫度。
標準孵育方法:37℃ 孵育30 min 或者室溫2h(檢測范圍:20-2000 μg/mL)
增強孵育方法:60℃ 孵育30 min(檢測范圍:5-250 μg/mL)
【注】:BCA 檢測蛋白濃度,延長孵育時間會加深顏色反應。升高溫度會加快顯色反應,但是溫度升高和時間延長會降低檢測下限,以及降低工作線性范圍。若蛋白濃度很低,可在較高溫度孵育或者適當延長孵育時間。
(3) 冷卻到室溫。在分光光度計上進行檢測,設定波長為 562 nm,在10 min內對所有樣品讀數。【注】:由于BCA 反應達不到真正的反應終點,即使溫度降低至室溫生色反應液會繼續。但是,由于室溫下生色比率相當低,因此若是10 min 內能對所有的樣本進行 562 nm 吸光度的測試,不會導致明顯錯誤。
(4) 根據BSA 標準品的吸光度(減去標準品中空白孔的OD 值即最終的讀數),繪制標準曲線(X-蛋白濃度μg/mL;Y-最終的OD 562nm)。依據標準曲線和樣品的稀釋倍數計算樣品蛋白濃度。
2. 微孔板檢測方法(樣品: BCA工作液=1:20)
(1) 各取10 μL標準品和待測樣品加入到微孔板中。【注】:樣品與工作液比例為1:20,檢測范圍為125-2000 μg/mL。若樣品濃度非常低,可使用25μL 標準品和待檢測樣品進行檢測(即1:8),這時試劑盒的檢測范圍為 20-2000 μg/mL。
(2) 每孔加入200 μL BCA 工作液,槍頭吹打充分混勻。蓋上微孔板,37℃ 孵育30 min。
(3) 冷卻到室溫,在酶標儀上的562 nm 波長范圍處檢測吸光度。
(4) 根據BSA標準品的吸光度(減去標準品中空白孔的OD值即最終的讀數),繪制標準曲線( X-蛋白濃度μg/mL;Y-最終的OD 562nm)。依據標準曲線和樣品的稀釋倍數計算樣品蛋白濃度。

注意事項

  1. 本產品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。

  2. 若測定標準曲線時無梯度變化,表明存在BCA法檢測干擾物,詳細的BCA法干擾物質兼容性表詳見官*


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