Millipore Amicon Ultra超濾離心管產品特點：

Amicon® Ultra離心超濾管

• 高回收率 Ultracel 再生纖維素膜具有一系列截留分子量

• 高回收率> 90%

• 垂直結構的膜減少了濃差極化，加快離心速度，快達 5 分鐘

• 熱密封膜將下游溶出物污染可能性降到較低

• 100% 完整性檢測確保性能可靠

• 透明外殼和體積刻度方便樣品察看

• 直接吸取樣品減少處理步驟

• 高濃縮倍數：80–100 倍

Millipore Amicon Ultra超濾離心管應用：

 • 生物樣品濃縮：包括抗原、抗體、酶、核酸或微生物

 • 組織培養提取物或細胞裂解液中大分子組分的純化

 • 對稀釋或從柱洗脫液預先純化的蛋白質進行濃縮

 • 脫鹽和緩沖液更換

Millipore Amicon Ultra超濾離心管訂購信息：

改進了垂直膜的設計，Amicon Ultra-0.5系列性能更好，離心時間更短

Amicon Ultra-4系列，用于濃縮物體積 1–4mL 的合適裝置

Amicon Ultra-4 超濾管超濾管使用離心管和蓋裝配。

Amicon Ultra-15系列，用于濃縮物體積 <15 mL

Amicon Ultra-15 超濾管超濾管使用離心管和蓋裝配
 

蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管（MWCO10kD）。也有其它型號 的、不同體積大小和MWCO超濾管可選，視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用，使用一次就扔掉太浪費。

1、選擇合適的超濾管，主要考慮MWCO和濃縮體積，見的是Ultra-15（10kD）。到底選擇多大截留分子量比較合適呢？10kDa、 5kDa、還是30kDa？通常應截留分子量不應大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾 管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書，注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同，表格中有。

2、新買來的超濾是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量*過膜，冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂的白線為準。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預冷。

3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾（離心機預冷至4度）。不同離心機的轉速 rpm換算成g之后，有所不同。具體可參閱附件里的說明書。離心機的加速度調至低檔，減小對膜的壓力。注意，一定要等離心機達到目的轉速之后，方可離開 離心機，否則離心機出問題時，無法一時間處理，后果不可預測！膜與轉軸的方向根據說明書調整（角轉離心機的情況是膜與軸垂直）。在實際使用中，一般轉速 開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。

4、當濃縮到剩下1ml時，【取50ul國產Bradford溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將 上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要準確判斷是否漏管，用5mg/ml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測】，繼續加入 剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉淀，導致堵管。若發生沉淀，要確定沉淀的具體原 因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時超濾，降低濃度的辦法解決，后者的方法是換不同的Buffer，直到蛋白不發生沉淀為 止。

5、前面幾步用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer（經0.22um超濾膜超濾），再 濃縮至1ml左右，連續三次，后一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定，一般不多于500ul，也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍 左右的體積濃縮算，三次達到1000倍以上，基本上可以達到換buffer的目的。

6、取出終蛋白濃縮液的操作在冰上操作，用黃槍頭（200ul）取，輕輕順著邊緣插入槍頭，輕輕吹打、混勻蛋白液，注意不要碰到超濾膜，然后吸取 濃縮液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的后一點濃縮液不必吸取，否則難度太大，有可能損壞超濾膜。后加入MilliQ水到超濾管中，沒過 超濾膜，防止膜失水變干。

7、以下是處理超濾管，重復利用超濾管的步驟。

8、倒出超濾管里的水，用milliQ水輕輕潤洗幾次，【若管底有可見的蛋白沉淀，可以先加入水，然后用槍頭吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀懸 起，然后倒掉，不可用自來水猛沖】然后加入0.2M的NaOH溶液，室溫放置20min，期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液，將 管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時，不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗，內壁再用 MilliQ水洗干凈。

9、取出浸沒的管芯，加至接近滿的MilliQ水，50ml管也加滿MilliQ水，將管芯慢慢放入50ml離心管，排出部分水，然后蓋上蓋子，放4度保存，直到下次使用。一般來說，按照上述步驟和注意事項，每根管用三四年不會壞。

問：超濾管能重復使用嗎？

答：可以。一般也就用個一兩次就換新的，網絡顯示可用2-5次。

用離心管濃縮一種蛋白，可以考慮使用，先用緩沖液洗滌，再用去離子水反復洗滌。殘留蛋白雜質多時，可以0.1N NaOH 清洗以及0.1% SDS清洗，去除和溶解蛋白質及其他雜質的。然后將超濾離心管的超濾膜泡在疊*鈉溶液或20%的乙醇溶液中，防止長菌，而且防干，只要超濾膜侵了水，就不可以再讓它干，否則超濾膜的分子結構就變了。

不可以用超聲洗滌！

注意：

1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。

2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

超濾離心管化學兼容性


密理博產品規格及價目表