經(jīng)過(guò)蛋白提取、純化和除雜處理所得的產(chǎn)物通常為包含靶蛋白的稀釋樣品，并且緩沖體系中存在與下游應(yīng)用不兼容的物質(zhì)。Pierce 蛋白濃縮管是一次性超濾離心裝置，用于對(duì)生物樣本（如蛋白質(zhì)和核酸）進(jìn)行濃縮、脫鹽和緩沖液置換，為下游應(yīng)用做好準(zhǔn)備。所需樣品處理操作非常簡(jiǎn)單，而且 pH 值為 1 至 9 的樣品均可兼容 。Pierce 蛋白濃縮管有四種規(guī)格（0.5 mL、6 mL、20 mL 和 100 mL）。

Nanocon™ 切向流濃縮管是用于外泌體、脂質(zhì)納米顆粒 (LNP) 及病毒富集的創(chuàng)新解決方案。其采用30 nm 孔徑的聚乙烯膜，非常適合納米級(jí)顆粒的分離富集，且可輕松適配250 mL 離心機(jī)適配器。

針對(duì)更大體積樣本，Pierce crossflow 切向流過(guò)濾裝置可實(shí)現(xiàn)高純度、高回收率的多肽、蛋白質(zhì)及病毒/病毒樣顆粒富集，適用于0.5 L–6 L 大體積上清液的濃縮。我們還提供與 crossflow 切向流過(guò)濾裝置配套使用的配件。

選擇合適的蛋白濃縮管

1、蛋白濃縮管, 3K 或 5K MWCO *

Thermo Scientific™ Pierce™ 蛋白濃縮管 (PES) 為一次性超濾離心管，配有聚醚砜（polyethersulfone，以下簡(jiǎn)稱 PES）膜，用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換。PES 膜的分子量截留量（molecular weight cutoff，以下簡(jiǎn)稱 MWCO）為 3K，可處理 5-20 mL 的樣品。

Pierce 蛋白濃縮管 (PES) 的特點(diǎn)：

•快速濃縮蛋白—使用 10 K MWCO濃縮管時(shí)，在 5-30 分鐘內(nèi)可將樣品濃縮 10-30 倍（濃縮所需的時(shí)間可能會(huì)隨截留分子量不同而有所變化）

•蛋白回收效果佳—典型蛋白回收率 >90%

•多功能—可用于生物樣品的濃縮、滲濾或緩沖液置換

•兼容性—可與定角轉(zhuǎn)頭和吊桶式轉(zhuǎn)頭兼容；無(wú)需反轉(zhuǎn)離心即可采集和回收樣品

為易于識(shí)別，每個(gè)裝置側(cè)面蝕刻了MWCO值。為利于添加樣品和回收，每個(gè)管側(cè)面均有帶刻度的透明窗口，以便目視測(cè)定截留體積。膜的垂直設(shè)計(jì)可實(shí)現(xiàn)高通量率、低非特異性結(jié)合和可忽略的膜上蛋白質(zhì)聚集；并提供了可靠一致的結(jié)果。

Pierce 蛋白濃縮管 (PES) 包含的膜可用于截留分子量比 PES 膜 MWCO 至少高出 2 倍的分子。使用小于推薦分子量的濃縮管，可能會(huì)降低回收率。蛋白回收率會(huì)因樣品中的特定蛋白質(zhì)及其起始濃度不同而變化。要實(shí)現(xiàn)蛋白回收率 >90%，蛋白樣品濃度至少為 0.1 mg/mL。

2、蛋白濃縮管, 50K MWCO

Thermo Scientific Pierce 蛋白濃縮管（PES [聚醚砜]）是一種能夠快速回收樣品并縮短處理時(shí)間的一次性離心裝置，使用本款產(chǎn)品可輕松快速地濃縮 50K 截留分子量 (MWCO) 的蛋白和生物樣品。這些濃縮柱可以與標(biāo)準(zhǔn)的微量離心機(jī)設(shè)備一起使用，并且可以在不需要反旋轉(zhuǎn)的情況下收集樣品。樣品可以在脫鹽或不脫鹽的情況下進(jìn)行濃縮。

對(duì)于具有 50K MWCO 的蛋白質(zhì)和其他生物樣品，如核酸，Thermo Scientific Pierce 蛋白濃縮管 (PES) 提供快速的蛋白濃縮、出色的樣品回收和儀器兼容性。這些離心裝置采用高通量聚醚砜 (PES) 膜，適用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換。本產(chǎn)品的截留分子量為 50K，可用于處理體積達(dá) 0.5–100 mL 的樣品。

50K MWCO 蛋白濃縮儀 PES 的特點(diǎn)：

•快速的蛋白濃縮—可在 15 分鐘或更短時(shí)間內(nèi)將樣品濃縮 10 至 30 倍

• 出色的蛋白回收—典型的蛋白回收率 >90%（當(dāng)樣品質(zhì)量至少比公布的 MWCO 大兩倍時(shí)）

• 儀器兼容性—可以使用具有水平吊籃（88504 除外）或固定角度轉(zhuǎn)子的標(biāo)準(zhǔn)微型離心機(jī)；無(wú)需反旋轉(zhuǎn)采集和回收樣品

• 多功能—輕松進(jìn)行生物樣品的濃縮、滲濾或緩沖液置換

為便于識(shí)別，每個(gè)管側(cè)面蝕刻 MWCO 值。為利于添加樣品和回收，每個(gè)管側(cè)面均有帶刻度的透明窗口，以便目視測(cè)定截留體積。膜的垂直設(shè)計(jì)可實(shí)現(xiàn)高通量率、低非特異性結(jié)合和可忽略不計(jì)的膜上蛋白聚集，并提供了可靠一致的結(jié)果，用于處理 0.5-100 mL 的樣品體積。當(dāng)樣品中蛋白的質(zhì)量至少是所用裝置 MWCO 的兩倍時(shí)，典型的蛋白回收率為 90%。例如，使用 IgG (MW ～150K) 樣品時(shí)，使用 5K、10K、30K 或 50K MWCO 濃縮管。可在 15 分鐘或更短時(shí)間內(nèi)將樣品濃縮 10 至 30 倍。

蛋白濃縮管 (PES) 應(yīng)用

• 組織培養(yǎng)基、抗血清或單克隆抗體制劑的蛋白濃縮

• 按凝膠滲透色譜法處理后出峰的蛋白質(zhì)的濃縮

• 蛋白質(zhì)修飾反應(yīng)后去除未結(jié)合的標(biāo)記物

• 從離子交換柱、疏水性相互作用柱 (HIC)、金屬螯合物柱或親和色譜柱洗脫下來(lái)的蛋白質(zhì)的濃縮、脫鹽/緩沖液置換

• 不同大小分子的分離

Pierce 蛋白濃縮管 (PES) 含有一個(gè)用于截留分子的膜，所截留分子的分子量至少是裝置內(nèi) PES 膜 MWCO 標(biāo)示值的兩倍。使用小于推薦分子量的濃縮管，可能會(huì)降低回收率。蛋白回收率會(huì)因樣品中的特定蛋白質(zhì)及其起始濃度不同而變化。

0.5 mL、2–6 mL、5–20 mL 和 20–100 mL 濃縮管的永停體積分別大約為 15 µL、30 µL、50 µL 和 350 µL。

要用 0.5 mL 濃縮管實(shí)現(xiàn) >90% 的蛋白回收率，蛋白樣品的濃度應(yīng)不得低于 0.05 mg/mL。對(duì)于所有其他濃縮管，蛋白樣品的濃度應(yīng)不得低于 0.1 mg/mL。

優(yōu)異的離心和速度

僅使用固定角度離心機(jī)，就可以在 15,000 × g 的最大離心力下有效使用 0.5 mL 濃縮管。

對(duì)于 2-6 mL 濃縮管，可以使用水平吊籃式或固定角度離心機(jī)型號(hào)。水平吊籃式離心機(jī)能夠產(chǎn)生 2,000–4,000 × g 的離心力，建議最大離心力為 4,000 × g。對(duì)于固定角度離心機(jī)，相關(guān)型號(hào)能夠產(chǎn)生 5,000–10,000 × g 的離心力，建議最大離心力為8,000 × g。

對(duì)于 5-20 mL 體積的濃縮管，可以使用水平吊籃式或固定角度離心機(jī)型號(hào)。水平吊籃式離心機(jī)能夠產(chǎn)生 2,000–5,000 × g 的離心力，建議最大離心力為 4,000 × g。對(duì)于固定角度離心機(jī)，相關(guān)型號(hào)能夠產(chǎn)生 5,000–8,000 × g 的離心力，建議最大離心力為 6,000 × g。

對(duì)于 20-100 mL 濃縮管，僅建議能夠產(chǎn)生 1,000–2,000 × g 離心力的水平吊籃式離心機(jī)。使用 2,000 × g 的最大離心力。不建議在固定角度轉(zhuǎn)子中使用這些濃縮管。

離心力、溫度、樣品體積、濃度和粘度都將影響過(guò)濾速率。因此，應(yīng)針對(duì)每種應(yīng)用優(yōu)化離心時(shí)間。

選擇合適的 crossflow 切向流濃縮裝置

Nanocon 切向流濃縮管

Thermo Scientific Nanocon 切向流濃縮管是一款先進(jìn)的濃縮設(shè)備，專(zhuān)為富集納米級(jí)顆粒而設(shè)計(jì)，包括外泌體、脂質(zhì)納米顆粒和病毒。該設(shè)備采用前沿切向流離心技術(shù)，并使用預(yù)處理、孔徑分布緊密的 30 nm 膜，在實(shí)現(xiàn)出色富集的同時(shí)，可大幅度地減少樣品損失。該濃縮管具有多功能性，可處理尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基等各種生物液體，是各種研究應(yīng)用中大體積樣本處理的理想選擇。

? 前沿技術(shù)—利用切向流離心的最新進(jìn)展，在競(jìng)爭(zhēng)激烈的外泌體研究領(lǐng)域保持當(dāng)先地位

? 高質(zhì)量富集—專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)用于確保獲得可靠且可重現(xiàn)的結(jié)果，同時(shí)不影響樣品完整性

? 優(yōu)化回收率—通過(guò)大幅度地減少樣品損失并提高回收率的高效分離工藝，可提高產(chǎn)量

? 廣泛的應(yīng)用范圍—適用于多種生物體液，包括尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基等，是針對(duì)大體積樣本進(jìn)行富集的通用工具

Nanocon 濃縮管設(shè)計(jì)為可處理高達(dá) 40 mL 的內(nèi)部樣本體積，是濃縮 40 mL 或更大樣本的理想選擇，并且與水平轉(zhuǎn)子兼容。濃縮管可出色地適配 250 mL 離心瓶適配器。建議最大離心力為 2,000 xg，在高效濃縮和樣品完整性之間實(shí)現(xiàn)理想平衡。

只需將樣本添加到裝置中并離心。富集后的樣本可使用 EasyPep MS 樣品制備試劑盒進(jìn)行制備，并通過(guò)質(zhì)譜法進(jìn)行分析。如果需要，可以使用外泌體分離試劑（貨號(hào) 10616D、10614D 和 10606D）進(jìn)行額外分離，以便通過(guò)蛋白質(zhì)印跡法、質(zhì)譜法、流式細(xì)胞術(shù)或透射電子顯微鏡進(jìn)行下游分析。

賽默飛產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

蛋白濃縮管

· 快速—在 5-30 分鐘內(nèi)將樣本濃縮多達(dá) 10-50 倍（具體時(shí)長(zhǎng)取決于 MWCO）

· 靈活—適用于 100 μL 至 100 mL 的樣本量，有多種 MWCO 產(chǎn)品可供選擇

· 高得率—可回收 >90% 的目標(biāo)樣本，同時(shí)去除雜質(zhì)或置換緩沖液

· 操作簡(jiǎn)單—管體帶有醒目標(biāo)記，樣本槽加寬，過(guò)濾槽可拆卸，操作更方便

· 兼容性好—可與使用固定角或旋轉(zhuǎn)吊籃轉(zhuǎn)頭的常規(guī)離心機(jī)配合使用

Crossflow 切向流過(guò)濾裝置

· 規(guī)模可擴(kuò)展—樣本處理量從 0.5 L–6 L 不等

· 快速—大多數(shù)濃縮和蛋白質(zhì)回收方案可于 30 分鐘或更短時(shí)間內(nèi)完成

· 通用—提供五種 MWCO 供選擇，兼容 pH 值達(dá) 13 的緩沖液

· 高得率—蛋白回收率可達(dá) >99% （需最后使用 25 mL 緩沖液沖洗）

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賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司