基因敲除 技術(shù)服務(wù)
- 公司名稱 北京欣興唐生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2020/3/28 22:39:50
- 訪問次數(shù) 578
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供貨周期 | 一個月以上 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
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技術(shù)原理
基因敲除原理:gRNA識別并結(jié)合在目標(biāo)基因區(qū)域引導(dǎo)Cas9蛋白對結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行切割,引起DNA雙鏈斷裂(DSB),觸發(fā)細(xì)胞自身的非同源末端修復(fù)機(jī)制(NHEJ),NHEJ修復(fù)的過程中往往會產(chǎn)生DNA的插入或刪除(Indel),造成移碼突變,致使基因功能喪失,從而實(shí)現(xiàn)基因敲除。
CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)/Cas(CRISPR-Associated)是一種由RNA指導(dǎo)Cas核酸酶對靶向基因進(jìn)行特定DNA修飾的技術(shù)。它是細(xì)菌和古細(xì)菌為應(yīng)對噬菌體和質(zhì)粒不斷攻擊而演化來的獲得性免疫防御機(jī)制。此系統(tǒng)的工作原理是通過人工優(yōu)化的具有引導(dǎo)作用的單鏈gRNA(Guide RNA)引導(dǎo)核酸酶Cas蛋白在與gRNA配對的靶位點(diǎn)處剪切雙鏈DNA,引起DNA雙鏈斷裂(DSB),進(jìn)而利用生物體內(nèi)非同源末端修復(fù)機(jī)制(NHEJ)或同源重組機(jī)制(HR)修復(fù)DNA,導(dǎo)致基因移碼突變、替換或刪除,致使基因功能喪失。
目前CRISPR/Cas9技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于哺乳動物、植物、鳥類、昆蟲、魚類、微生物等各個領(lǐng)域。