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普魯士藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)技巧

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普魯士藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

 

 

普魯士藍(lán)染色簡(jiǎn)介:

Perls普魯:士藍(lán)反應(yīng)(Prussian blue reaction)又稱為含鐵血黃素染色,即經(jīng)過亞鐵青化鉀和稀酸處理后可以產(chǎn)生藍(lán)色,常見于吞噬細(xì)胞內(nèi)或間質(zhì)內(nèi),主要顯示三價(jià)鐵鹽。其染色原理為:三價(jià)鐵離子被從蛋白質(zhì)中被稀鹽酸分離出來,生成不溶解的藍(lán)色化合物,即普魯士藍(lán)。

 

普魯士藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)意義:

Perls普魯:士藍(lán)是非常經(jīng)典的組織化學(xué)反應(yīng),是顯示組織內(nèi)三價(jià)鐵的一-種敏感、傳統(tǒng)優(yōu)良的方法。

實(shí)驗(yàn)步驟:

(1)石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯| 20min-二甲苯11 20min-無水乙醇I 5min-無水乙醇1I 5min-75%酒精5min,自

來水洗,蒸餾水洗3遍。

(2)普魯士藍(lán)染色:將亞鐵青化鉀溶液和鹽酸溶液等比例混合成普魯士藍(lán)染液,切片入染液中染色1h,蒸餾水洗2遍。

(3)核固紅染色:核固紅染液染色1-5min,流水沖洗。

(4) 切片依次放入無水乙醇I 5min-無水乙醇11 5min-無水乙醇11 5min-二甲苯| 5min-二甲苯15min透明, 中性樹膠封片。

(5)顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

鐵離子呈藍(lán)色:細(xì)胞核呈紅色。

實(shí)驗(yàn)技巧:

(1)普魯士藍(lán)染液要現(xiàn)配現(xiàn)用。

(2)切片染色前用蒸餾水洗干凈,防止自來水中的鐵離子在染色中反應(yīng),造成假陽性。

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

CCK8檢測(cè)

基因組DNA提取

 

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化

熒光定量PCR

動(dòng)物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測(cè)

ROS氧化分析

激光共聚焦

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞劃痕

鈣離子濃度檢測(cè)

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

microRNA測(cè)序

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

探針合成

ATP/ADP檢測(cè)

石蠟/冰凍切片

定點(diǎn)突變

線粒體膜電位(MMP)檢測(cè)

細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定

藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

 

免疫共沉淀

真核表達(dá)載體構(gòu)建

染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

非標(biāo)定量(Label-free)實(shí)驗(yàn)



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