細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養瓶內，補加適量培養基，輕輕晃動培養瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態；

14.將細胞放回二氧化碳培養箱中靜置培養。

商品屬性：

產品主要成分

BEBM kit培養基  (Lonza/Clonetics，CC-3170)

備注：培養基包含（A+B）

A： BEBM 基礎培養基         500ML

保存條件：2-8℃

B:  細胞生長添加劑            一套（包含下列試劑）

● BPE, 2.0 ml ● Hydrocortisone, 0.5 ml    ● hEGF, 0.5 ml

● Epinephrine, 0.5ml  ● Insulin,0.5 ml      ● Transferrin, 0.5 ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養體系的液體和有培養體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養皿中，補加新鮮培養基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞凍存?：

選擇對數生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產品：

小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human guanine exchange factor (GEF) ELISA Kit 人鳥苷酸交換因子(GEF)試劑盒

Humanparathyroidhormonerelatedpeptide,PTHrpELISAKit 人副甲狀旁腺激素相關肽(PTHrp)試劑盒 96T/48T 進口分裝

GuineapigLebtospiraIgG試劑盒豚鼠鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性濾膜染色試劑盒(帶濾膜)20次

MouseCalcitonin,CTELISAKit小鼠降鈣素(CT)試劑盒規格：96T/48T

大鼠載脂蛋白C2(APOC2)試劑盒 ，英文名： APOC2 ELISA Kit

Mouse phospho exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 小鼠0酸化細胞外信號調節激酶(pERK)試劑盒

MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKIT 小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit人絲狀血球凝集素

細胞/組織高粘性多聚賴載玻片制備試劑盒5次(50至100片)

ELISAKitMMP-7大鼠基質金屬蛋白酶7

小鼠堿性0酸酶(ALP)試劑盒   96T/48T

小鼠堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)試劑盒   96T/48T

小鼠堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)試劑盒   96T/48T

小鼠堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)試劑盒   96T/48T

磷酸化Ets轉錄因子家族ets1抗體

嗅覺受體51B6抗體

FCGR4重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標簽) Protein

Adenylate Kinase 1 (AK-1 0.5mgAdenylate Kinase 1 (AK-1) 腺苷酸激酶-1

FAM19A2重組人 FAM19A2 蛋白  Protein

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標簽), Biotinylated

CLEC1A Protein Rat 重組大鼠 CLEC屬

BEGM kit培養基甲狀旁腺激素(PTH)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)

EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein

IL1B Protein Canine 重組狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白

CPLX3重組人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein