小鼠結腸平滑肌原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠結腸平滑肌細胞分離自結腸組織；結腸在右髂窩內續于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分，大部分固定于腹后壁，結腸的排列酷似英文字母“M”，將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結締組織），肌層（內環形、外縱行兩層平滑肌），外膜（纖維膜或漿膜）。結腸平滑肌細胞主要分布于黏膜肌層和肌層的內環形、外縱行平滑??；結腸運動少而緩慢，對刺激的反應也較遲緩。結腸平滑肌在食物消化與吸收、腸道運動和物質分泌、誘發全身炎癥反應以及細胞內信號轉導途徑等研究中起著重要的作用。結腸平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。結腸平滑肌運動活性受到神經遞質、胃腸激素和藥物等因素的調節。隨著現代胃腸動力學研究的進展，對胃腸運動的研究已從器官、組織水平發展到細胞、分子水平，要求在胃腸道單個平滑肌細胞標本上來完成各種電生理、藥理和分子生物學等實驗。體外培養細胞，由于影響因素單一，是研究細胞功能以及相應的細胞信號轉導機制的基礎。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠結腸平滑肌細胞采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠結腸平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養法

　?、?懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

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　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

SW038-C2-tk細胞，轉染了tk基因的SW038-C2細胞 副溶血性弧菌 人臍靜脈平滑肌細胞RNAHUVSMC miRNA5 μg  試劑耗材  人臍靜脈平滑肌細胞 人胚肺細胞，NCI-H1563[H1563]細胞 MLTC-1(間質細胞瘤細胞)  CL-0149MCF-7 人原代子宮微血管內皮細胞 豬原代胸腺成纖維細胞

GRP94 (gp96 0.5mgGRP94 (gp96) 94kDa 糖調節蛋白(抗原)

BLOC1S2 Protein Human 重組人 BLOC1S2 / BLOS2 蛋白 (GST 標簽)

IL1R2重組大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 (His 標簽) Protein

PGLYRP1 Protein Mouse 重組小鼠 PGLYRP1 / PGRP-S 蛋白 (His 標簽)

ANP32A重組人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

大鼠谷酰胺(Gln)試劑盒 ，英文名： Gln ELISA Kit

Porcine ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 豬α干擾素(IFN-α)試劑盒

出血性大腸桿菌(EHEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIP-1Alpha/CCL3(HumanMacrophageInflammatoryProtein-1Alpha)ELISAkit人巨噬細胞性蛋白1α

體液科薩基病毒B(CoxsackievirusB)定性試劑盒20次

ELISAKit2,3-DPG犬2,3-二0酸甘油酸

豬圓環病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

豬圓環病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸試劑盒   48T

豬乙型腦病毒(JEV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

豬乙型腦病毒(JEV)核酸試劑盒(-PCR法)   48T

小鼠結腸平滑肌原代細胞小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat monocyte chemotactic protein 3 (MCP-3/CCL7) ELISA Kit 大鼠單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)試劑盒

Humanansferfactor,TFELISAKit 人轉移因子(TF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor25(OH)D3/25HVD3(Human25-DihydroxyvitaminD3)ELISAKit人25羥基3

飲料果膠化學比色法定量試劑盒20次

MouseL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit小鼠L苯解氨酶(PAL)試劑盒規格：96T/48T

OPCML重組人 OBCAM / OPCML 蛋白 (His 標簽) Protein

微粒體S轉移酶1(MGST1)重組蛋白 Recombinant Microsomal Glutathione S Transferase 1 (MGST1)

KIRREL重組人 KIRREL1 / NEPH1 蛋白 (His 標簽) Protein

CADM1 Protein Human 重組人 SynCam / CADM1 / TSLC1 / IGSF4 蛋白 (His 標簽)

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。