概念和原理

    凝膠遷移實驗是一種研究DNA結合蛋白質和與其相應的DNA序列相互作用的技術，可用于定性和定量分析。這一技術zui初用于研究DNA結臺蛋白質，目前已用于研究RNA結合蛋白質和特定的RNA序列的相互作用。這項技術是基于DNA/蛋白質或RNA/蛋白質復合體在聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)中有不同遷移率的原理。通常將純化的蛋白質或細胞粗提液和32P同位素標記的DNA或RNA探針一同保溫，在非變性的聚丙烯凝膠電泳上，分離復合物和非結臺的探針，當?shù)鞍踪|與一條人工合成的特異的DNA或RNA結合后，其在PAGE中的遷移率將小于未結合核蛋白質轉錄因子的DNA，從而檢測到活化的與DNA或RNA結合的蛋白質轉錄因子。標記的探針根據(jù)研究的結合蛋白質的不同，可以是雙鏈或者是單鏈。

  當檢測如轉錄調控因子一類的DNA結合蛋白質，可用純化蛋白質，部分純化蛋白質或核蛋白質提取物。在檢測RNA結合蛋白質時，依據(jù)目的RNA結合蛋白質的位置，可用純化或部分純化的蛋白質，也可用細胞核或胞質提取物。競爭實驗中采用含蛋白質結臺序列的DNA或RNA -片段和寡核苷酸片段（特異）和其它非特異片段，來確定DNA或RNA結合蛋白質的特異性。在競爭的特異和非特異片段的存在下，依據(jù)復合物的特點和強度來確定特異結合。

科研和臨床應用

研究DNA結合蛋白質和其相關的DNA結合序列間的相互作用；

DNA定性和定量分析；

研究RNA結合蛋白質和特定的RNA序列的相互作用。

標本采集、保存、運輸

組織樣品：新鮮組織放入液氮或-80℃保存，組織不少于200mg，冷凍運輸；

培養(yǎng)細胞：通過細胞計數(shù)取不少于2×106個細胞于EP管，加入0.5ml生理鹽水或蛋白質保護劑，混勻后保存于-80℃冰箱，冷凍運輸；

血液細胞標本：以抗凝管保存全血或以淋巴細胞分離液分離單核細胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白質保護劑，混勻后保存于-80℃保存，避免反復凍融，冷凍運輸；

血清或細胞培養(yǎng)液標本：離心去掉雜質后取上清入EP管，4℃可保存15-20天，-80℃可*保存，避免反復凍融，冷凍運輸。

客戶須知

客戶告知實驗分組、編號及背景設計資料，有具體要求請事先說明；

抗體：自備抗體，如無則由本公司代購；

探針：自備探針，如無則由本公司代為設計合成。

報告形式

圖片報告形式
                      
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