PK136小鼠B淋巴細(xì)胞系
PK136小鼠B淋巴細(xì)胞系是從免疫小鼠脾臟中分離獲得的特異性 B 淋巴細(xì)胞系,因能穩(wěn)定表達(dá)功能性 B 細(xì)胞受體(BCR)并分泌特定抗體,成為免疫學(xué)研究中解析 B 細(xì)胞活化機(jī)制、抗體生成規(guī)律及免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)的重要模型。
在細(xì)胞表型與功能方面,PK136 細(xì)胞展現(xiàn)出典型的成熟 B 淋巴細(xì)胞特征。其表面高表達(dá) CD19、CD20 等 B 細(xì)胞特異性標(biāo)志物,同時(shí)表達(dá)主要組織相容性復(fù)合體 Ⅱ 類分子(MHC-Ⅱ),具備抗原呈遞能力。作為體液免疫的核心效應(yīng)細(xì)胞,PK136 細(xì)胞在抗原刺激下可經(jīng)歷克隆擴(kuò)增,分化為具有抗體分泌功能的漿細(xì)胞樣表型,其分泌的抗體能特異性識(shí)別靶抗原,這種抗原 - 抗體反應(yīng)的高度特異性為免疫檢測(cè)技術(shù)提供了關(guān)鍵工具。此外,細(xì)胞內(nèi)存在完整的 B 細(xì)胞活化信號(hào)通路,當(dāng)受到脂多糖(LPS)或抗 IgM 抗體刺激時(shí),可激活 NF-κB、MAPK 等下游信號(hào)分子,引發(fā)鈣離子內(nèi)流和細(xì)胞增殖應(yīng)答,完mei復(fù)刻了體內(nèi) B 細(xì)胞的活化過程。
體外培養(yǎng)體系中,PK136 細(xì)胞呈現(xiàn)獨(dú)te的生長(zhǎng)特性。在含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基中,細(xì)胞以懸浮生長(zhǎng)為主,部分細(xì)胞形成松散的細(xì)胞團(tuán),傳代周期約 48-60 小時(shí)。與原代 B 淋巴細(xì)胞相比,其克服了體外存活時(shí)間短(通常僅 3-5 天)、難以大量擴(kuò)增的局限,連續(xù)傳代 40 次后仍能保持抗原識(shí)別能力和抗體分泌活性,且細(xì)胞群體均一性高,有效減少了個(gè)體差異導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)偏差,適合開展標(biāo)準(zhǔn)化的免疫機(jī)制研究。
該細(xì)胞系的研究?jī)r(jià)值廣泛體現(xiàn)在多個(gè)免疫學(xué)領(lǐng)域。在 B 細(xì)胞活化機(jī)制研究中,通過檢測(cè) PK136 細(xì)胞在不同抗原刺激下的磷酸化蛋白譜,可揭示 BCR 信號(hào)通路中關(guān)鍵分子(如 Syk、BTK)的調(diào)控作用;在抗體工程領(lǐng)域,利用其分泌的特異性抗體,可構(gòu)建噬菌體抗體庫(kù)或通過基因工程改造獲得人源化抗體,為疾病診斷試劑研發(fā)提供核心材料;在自身免疫病模型研究中,通過誘導(dǎo) PK136 細(xì)胞產(chǎn)生抗自身抗原抗體,可模擬系統(tǒng)性紅斑狼瘡等疾病的體液免疫異常狀態(tài),解析自身抗體的致病機(jī)制。
此外,PK136 細(xì)胞在免疫調(diào)節(jié)研究中也發(fā)揮著重要作用。其與 T 細(xì)胞的共培養(yǎng)體系可用于探究 T-B 細(xì)胞相互作用對(duì)抗體類別轉(zhuǎn)換(如 IgM 向 IgG 轉(zhuǎn)換)的影響,通過檢測(cè)細(xì)胞因子(如 IL-4、IFN-γ)的分泌變化,闡明輔助性 T 細(xì)胞對(duì) B 細(xì)胞功能的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。
隨著單細(xì)胞測(cè)序和類器官技術(shù)的發(fā)展,PK136 細(xì)胞與濾泡樹突狀細(xì)胞共構(gòu)建的淋巴濾泡類器官模型,能更精準(zhǔn)地模擬體內(nèi)生發(fā)中心微環(huán)境,為解析抗體親和力成熟機(jī)制和開發(fā)新型疫苗佐劑提供更接近生理狀態(tài)的研究平臺(tái)。
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