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病毒的雞胚培養2012/07/04

一、目的要求掌握雞胚尿囊腔接種培養新城疫病毒的操作技術.二、器材1.雞胚應選用健康雞群的受精蛋,接種雞的雞胚應無母源抗體,以免影響病毒在胚胎中的增殖.實驗用的雞胚多采用9—10日齡的活胚.2.接種材料新城疫I系疫苗3.各種器械孵卵器、照蛋箱、蛋架、打孔器、1ml結核菌素注射器、41/2號注射針頭、鑷子、3%碘酊、75%酒精棉球、鉛筆、酒精燈、剪刀、眼科鑷子、滅菌的疫苗瓶、滅菌滴管和固體石蠟等.三、內容和方法（一）接種前的準備1.雞胚的準備本實驗選擇9—10日齡的雞胚,在照蛋時以鉛筆勾劃出氣室,于

適應性免疫涉及的一些重要概念2012/07/02

1．三個特點（1）特異性：二次應答時能精細地區分致敏的抗原和其他無關的抗原；因而免疫應答的特異性指的是抗原特異性（2）多樣性：參與獲得性免疫應答的淋巴細胞，其表面識別結構和相應分子（如抗體）所顯示的高度異質性，賦予機體具有識別數量極大的抗原并與之起反應的能力。多樣性是特異性產生的基礎。（3）記憶性：再次遇到同一抗原時，出現增強性應答。免疫記憶由記憶性淋巴細胞承擔。2．應答類型（1）體液免疫和細胞免疫：由抗體一類可溶性分子介導的免疫應答稱為體液免疫；由免疫細胞主要是T細胞介導的免疫應答稱為細胞免疫

吸光和發光組織樣品的常用測量參數2012/06/29

像素是顯微圖像分析系統的zui小測量單位，通過它我們不僅能夠得到待測范圍內的幾何形態信息，如面積、周長和直徑等等，還可根據樣品是否能夠吸光或發光來測量其物質的總含量。在組織化學和免疫組織化學中常用熒光素來標記物質，使被測量物質產生有色熒光，從而進行分析。此外，在原位雜交技術中，采用放射自顯影的標本也可以作為發光組織細胞樣品使用顯微圖像分析系統進行分析。（一）眼光組織細胞樣品的測量對于吸光組織細胞樣品，圖像分析系統至少能以下列三種參數來表述細胞待測物質的計量結果：1．積分光密度（integrate

體內鈉離子與心跳有重要聯系2012/06/27

如果在人群中驀然看到心儀已久的人，我們會心跳加速。英國哥倫比亞大學zui近的一項研究表明，與驚鴻一瞥帶來的震撼相比，體內鈉離子運動和心臟跳動之間的關系可能更加密切。據美國物理學家組織網2月13日報道，研究人員利用了加拿大同步加速器光源，揭示了一種鈉通道控制心臟跳動的分子機制，鈣離子也和這種機制有關。相關論文發表在2月14日出版的《美國國家科學院院刊》上。心肌細胞的收縮與舒張全靠一種微小但卻十分精細的電脈沖來控制。在細胞內部和細胞之間有著復雜的分子通道，當金屬離子如鈉、鉀、鈣通過這些通道時，就產生

英發現可引發炎癥性疼痛的分子2012/06/25

在陽光明媚的夏天，不少日光浴愛好者都難免出現曬傷狀況，那種刺痛的感覺一般都會持續好幾天的時間。據英國《新科學家》雜志近日報道，英國科學家發現一種分子可能與此相關，通過對這種分子的研究或許有助于弄清關節炎等慢性疼痛的根源，開發出能迅速起效的新型止痛藥。相關論文發表在《科學·轉化醫學》雜志上。由英國維康信托基金會和英國生物技術與生物科學研究理事會（BBSRC）資助的這項研究，使用中波紫外線對10位志愿者身上的一小塊皮膚和大鼠進行照射，而后對被曬傷的皮膚進行活檢和篩選，以找出炎癥反應中可能引發疼痛的因

開發出一種阻斷癌癥信息進入細胞核的小肽2012/06/21

以色列魏茲曼研究所開發出的一種小分子阻止致癌信息進入細胞核.在一種環境中的好消息可能是另一種環境中的災難.比如對癌癥而言,當某一種細胞接受指令而進行生長和無限制分裂時,這對細胞本身而言是個好信息,但是對體內容納這種細胞的個人而言卻是個不好的消息.魏茲曼研究所科學家們成功地解碼出和阻斷一類促進細胞不受約束生長的分子信息.這種分子信息首先到達細胞膜,但是它的zui終目標是含有DNA的細胞核.這是該信息需要跨越的距離,相當于人類的50公里.為了快速地達到細胞核,這種信息通過一種化學信使鏈（chaino

瞬時轉染分析法2012/06/19

1.瞬時轉染分析法目前有很多功能性分析方法用于研究轉錄調控,zui常用的方法是瞬時轉染分析法.該方法是通過一定的轉染程序將含目的調控區的質粒導人培養細胞.在典型情況下,調控區調控“報告基因”的轉錄.報告基因是在mRNA和蛋白質的水平上都易于被正確檢測到的基因.產生的質粒在培養細胞中轉錄后,在特定時刻測定從報告基因上合成的mRNA或蛋白質,以評價調控區的活性.人們將這種分析方法稱為瞬時轉染分析,因為此時質粒仍然以附加的形式存在,很少整合進宿主基因組.因此,mRNA或蛋白質產物必須在短時間內（1～3

組織相容性復合體2012/06/13

主要組織相容性復合體（MHC）是由一組高度多態性基因組成的染色體區域。MHC基因產物能在不同細胞表面表達，通常稱之為MHC分子或MHC抗原，又因這些抗原在器官移植中代表供受者雙方的組織相容程度，也稱為移植抗原或組織相容性抗原。脊椎動物中，從魚到人類都存在結構與功能相似的MHC遺傳區域，如小鼠的MHC是H-2，堵的MHC是SLA，人的MHC是HLA。MHC是現知多態性zui為豐富的一個基因系統，擁有大量的等位基因，賦予種群巨大潛力以適應多變的內外環境。MHC分子不但在T細胞分化發育中是必需的，而且

主要組織相容性復合體2012/06/13

主要組織相容性復合體（MHC）是由一組高度多態性基因組成的染色體區域。MHC基因產物能在不同細胞表面表達，通常稱之為MHC分子或MHC抗原，又因這些抗原在器官移植中代表供受者雙方的組織相容程度，也稱為移植抗原或組織相容性抗原。脊椎動物中，從魚到人類都存在結構與功能相似的MHC遺傳區域，如小鼠的MHC是H-2，堵的MHC是SLA，人的MHC是HLA。MHC是現知多態性zui為豐富的一個基因系統，擁有大量的等位基因，賦予種群巨大潛力以適應多變的內外環境。MHC分子不但在T細胞分化發育中是必需的，而且

抗體片段及其衍生形式2012/06/11

1．雙特異性抗體將兩套輕鏈、重鏈基因導入骨髓瘤細胞中，選擇合適的抗體恒定區及Ig類型，可獲得產量大、均一性和高純度的雙特異性抗體。另外，以化學交聯技術或雜交—雜交瘤技術也可獲得雙特異性抗體。2．Fab抗體Fab抗體是由重鏈Fd（即VM+CHl）和完整輕鏈通過二硫鍵結合而成的異二聚體，僅含一個抗原結合部位。將重鏈Fd和完整輕鏈的編碼基因連接，5，端融合細菌蛋白信號肽基因可在大腸桿菌內分泌型表達，形成完整的立體折疊和鏈內、鏈間二硫鍵，保持Fab片段的功能。3．Fv抗體其制備原理是：分別構建含VH和V

酶免疫電泳技術2012/06/08

一，酶免疫電泳技術的原理抗原與抗體在瓊脂糖凝膠中電泳時，在堿性緩沖液的條件下，抗原帶負電，向正極移動。不同分子量或還不同電荷的抗原，在相同條件下，移動距離不等。這些在不同部位的抗原，再與相關抗體經擴散形成免疫沉淀線。酶免疫電泳技術中的抗原與抗體就是酶和它的相應抗體球蛋白。酶抗原與酶抗體形成的免疫復合物是用底物顯色的，由于酶反應的高度靈敏性，使酶免疫電泳技術成為一項靈敏度高的檢測技術，但僅局限于酶蛋白的分析鑒定。二，辣根過氧化物酶（HRP）免疫電泳技術的程序1，器材與設備電泳儀（包括電泳槽）；溫箱

中國嬰兒為何不喝國產奶2012/06/05

幾年間，國內洋奶粉均價已經從200元邁上了300元大關。其中，惠氏旗下品牌“啟賦”1段已賣到408元，雀巢的超級能恩1段也賣到了318元，容量卻從900克調低到800克。而在韓國和東南亞國家，這些產品的價格只有內地市場的一半，洋奶粉在中國內地的售價成為名副其實的zui高。然而，這絲毫未影響國內消費者的消費激情，尤其是*的洋奶粉已經成為國內不少媽媽的。洋奶粉賣價之所以能在中國步步登高，勇奪zui高稱號，絕非偶然。洋奶粉漲價主要發生在2008年三聚氰胺事件之后，在這之前，國有品牌奶粉的*是60%，而

新基因測序儀器在張江問世2012/05/29

如今，腫瘤靶向治療和個體化用藥正在醫學界推廣，要開展這類“基因治療”，對人體的基因測序*。記者昨天獲悉，*液相定點基因測序儀在張江高科技園區問世，這種儀器在癌細胞比例低于20%的樣品中，能檢測出基因變異，而目前醫院使用的基因測序技術，都要求癌細胞數不得低于40%。生物芯片上海國家工程研究中心的專家表示，這一發明具有廣闊的醫學應用前景。據研發人員黃新華介紹，基因測序是人類基因組計劃的關鍵技術，有基因檢測“金標準”之稱。一般基因測序主要包括三個步驟：首先，是PCR擴增，對待檢測的DNA進行復制放量；

抗甲狀腺球蛋白自身抗體2012/05/24

1956年Witebsky和Rose以免甲狀腺球蛋白（Thyroglobulin，Tg）免疫其他的兔子時，發現被免疫的兔子體內可產生與兔Tg反應的抗體。隨后的研究發現橋本甲狀腺炎、甲狀腺癌以及一些與甲狀腺相關的疾病中存在抗Tg抗體。在自身免疫性甲狀腺病中Tg抗體出現較TPO抗體早，因而Tg抗體是甲狀腺發生自身免疫損傷的一個較好的血清標志物。Burek于1982年對家族中青少年甲狀腺炎的調查結果支持這一觀點，認為Tg自身抗體很可能是*個自身免疫標志物，隨后是微粒體抗體。致病作用通過轉輸T淋巴細胞，

DNA合成儀的發展2012/05/21

當前DNA合成儀的主要生產廠商都致力于機器性能的完善和應用領域的開拓以及率、高產率的儀器的開發與研究。中國臺灣科學委員會“基因醫藥衛生科技研究計劃”中的基因生物技術組已經成功研發**臺高密度復制DNA合成儀，可以同時合成384條不同DNA，每日可合成768條DNA，并可以配合聚合酶連鎖反應裝置，大量復制各種基因，不但節省時間，也可節省大量人力，這部機器能復制動物、人體、植物的基因甚至是防偽基因。由于人們所需要的大部分核酸的堿基對數量遠遠超過目前DNA合成儀可以合成的zui長核酸鏈的堿基對數量，因

特異性循環免疫復合物的測定2012/05/18

特異性CIC分為單特異性CIC和雙特異性CIC兩類。前者適用于檢測已知抗原及其相應抗體組成的CIC。雙特異性CIC是指對組成CIC的抗原、抗體和補體中某兩種成分組合明確的CIC，常采用的檢測方法為ELISA和RIA技術，需要兩種特異性各異的抗體。因此，檢測要求條件較高，但能較全面地反映CIC的病理意義。在檢測雙特異性CIC時，由于要求有兩種特異性抗體，每種抗體均可用作包被或檢測抗體，故具體到檢測某類雙特異性CIC時，根據兩種抗體的不同，可使用兩種方法。以ELISA法為例，如檢測HBsAg／IgC

胰蛋白酶解離法檢測HBsAg-CIC2012/05/15

用3．5％PEG選擇性地沉淀血清中CIC，繼之用胰蛋白酶消化沉淀物中的抗體蛋白，分離出抗原部分，用反向間接血凝法測定HBsAg滴度。與不加胰蛋白酶的對照管比較，如HBsAg滴度升高，則說明有HBsAg-CIC的存在。1．試劑①pH8．4硼酸鹽緩沖液（BBS）：配制法同*節中PEG沉淀試驗；②7％PEG及3．5％PEG溶液：用BBS配制；③10mg／mL胰蛋白酶溶液：用pH8．2巴比妥緩沖液配制。2．操作步驟（1）在測定管與對照管內務加待測血清0．2mL。（2）兩管各加pH8．4BBSl．8mL，

免疫熒光技術（IFT）診斷禽流感2012/05/10

免疫熒光技術就是熒光抗體技術（FAT）。IFTzui早用于病毒的鑒定和定位病毒感染細胞中特異性抗原，主要是核內熒光。用M1抗原的熒光抗體主要出現胞質熒光，核內也有部分熒光。IFT早在1961年就開始用于人類流感的快速診斷，1984年賓夕法尼亞州暴發禽流感時Skeeles將IFT用于AIV的檢測。用于禽流感病毒的診斷常用直接熒光抗體法，即在組織觸片上直接染色、以熒光顯微鏡檢查熒光。一種AIV的熒光抗體可用來檢測不同亞型的其他病毒。IFT用于禽流感的診斷具有快速、簡便和敏感性好的特點，而且檢測成本費

IL-17的檢測2012/05/08

IL-17是新近被確認的一種細胞因子，由T細胞，主要是CD4+T細胞產生，其靶細胞廣泛。可激活轉錄因子NF-KB，誘導纖維母細胞產生IL-6、ID8、GM-CSF、和膜性細胞間粘附分子1（1CAM-1），促進由亞適劑量PHA所誘導的T細胞增殖。目前編碼IL-17及其受體的基因核苷酸序列已被部分測定。（1）IL-17的誘導：取人PBMC或純化的CD4+T細胞，加入誘導劑（PMA5ng／mL+ionomycin3ug／mL，或ConA63ug／mL，或抗CD28抗體+CD3抗體），37℃孵育48—7

豬繁殖與呼吸綜合征病原檢測2012/05/03

診斷時zui重要的步驟是選擇合適的樣品，這樣才能獲得有用的實驗室資料。一般來講，從幼豬而非大豬中采集樣品，因為在幼豬中的PRRSV的數量多，持續時間長。感染后4—6周能從乳豬、斷奶仔豬或架子豬的血清中分離血清。病毒分離用的樣品在采集后迅速冷藏或凍貯，因為PRRSV對病毒很敏感，在運輸過程中必須注意溫度不能升高，否則PRRSV易被滅活而不能進行病毒分離。此外，病毒對pH的穩定性范圍很小，因此必須保證無菌環境，以避免細菌污染而導致pH改變。樣品必須用絕緣和防漏的容器包裝，有足夠的冷凍劑，迅速遞送到相