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山羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒實驗使用說明書

  • 資料類型

    doc
  • 文件大小

    17KB
  • 瀏覽次數

    62次
  • 上傳時間

    2025年06月18日
關鍵詞
山羊白介素1β,ELISA試劑盒,IL-1β 試劑盒,酶標抗體?,標準品
上傳者
本生(天津)健康科技有限公司
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資料簡介

  以下是山羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南:

  BS-6400 山羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒

  一、實驗原理?

  采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。包被微孔中的捕獲抗體與樣本中的IL-1β結合后,依次加入HRP標記的檢測抗體,經顯色反應(TMB底物)后,通過450nm波長測定OD值,濃度與顏色深淺呈正相關。

  二、試劑盒組成?

  微孔酶標板?:預包被抗體的96孔板(可拆卸)

  標準品?:凍干粉(通常含6-8個濃度梯度,如10,000-156 pg/mL),需用稀釋液復溶

  檢測抗體?:HRP標記的檢測溶液A/B,需按1:100稀釋

  洗滌緩沖液?:30倍濃縮液,使用前需蒸餾水稀釋

  顯色底物?:TMB(A/B液分裝,避光保存)

  終止液?:2N H?SO?溶液

  三、樣本處理?

  血清/血漿?:

  采集后3000×g離心10分鐘(血清)或30分鐘(血漿,需抗凝劑處理)

  避免溶血或脂血,分裝保存于-20℃,避免反復凍融

  細胞上清/組織勻漿?:

  離心去除顆粒(3000×g,10分鐘),取上清檢測

  四、操作步驟?

  試劑平衡?:所有組分室溫平衡15-30分鐘,濃縮洗滌液需溶解結晶(可水浴加溫)

  加樣?:

  空白孔:不加樣品

  標準孔:50μL系列濃度標準品

  樣本孔:先加40μL稀釋液,再加10μL樣本(最終稀釋5倍)

  溫育?:37℃孵育30分鐘,封板膜覆蓋

  洗滌?:棄液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復5次,拍干

  加酶標抗體?:每孔50μL HRP標記抗體(空白孔除外)

  顯色?:避光加入TMB A/B液各50μL,37℃顯色10分鐘(藍色→黃色)

  終止與檢測?:每孔加50μL終止液,立即用酶標儀測450nm OD值

  五、注意事項?

  質量控制?:每次實驗需做標準曲線及復孔,批內/批間CV應<12%

  干擾因素?:避免細菌污染(內源性HRP導致假陽性)、溶血或反復凍融

  保存條件?:未使用的板條需密封防潮,試劑2-8℃保存,禁止冷凍

  六、結果計算?

  以標準品濃度為橫坐標、OD值為縱坐標繪制曲線,樣本濃度通過曲線方程計算后乘以稀釋倍數。若樣本OD值超出標準曲線范圍,需進一步稀釋后重測。

  注:以上資料僅供參考,如需更詳細的參數(如靈敏度、檢測范圍),請參考具體說明或是咨詢供應品牌商。

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