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Streptavidin-SH,鏈霉親和素-巰基的應用

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    2025年06月08日
關鍵詞
Streptavidin-SH,鏈霉親和素-巰基
上傳者
陜西星貝愛科生物科技有限責任公司
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資料簡介

鏈霉親和素-巰基(Streptavidin-Thiol)是一種經過化學修飾的鏈霉親和素,通過在其分子結構上引入巰基(-SH)功能團,使其能夠與其他分子或表面進行共價連接,廣泛應用于生物研究和診斷領域。

一、結構與性質

  • 結構:鏈霉親和素是一種高親和力的生物素結合蛋白,通過在其分子結構上引入巰基(-SH)功能團,形成鏈霉親和素-巰基。

  • 性質:巰基具有較高的化學反應活性,能夠與多種含有親電基團的分子發生反應,如與馬來酰亞胺基團發生特異性的邁克爾加成反應,還能與金、銀等金屬表面形成穩定的化學鍵。鏈霉親和素-巰基結合了鏈霉親和素的特異性和巰基的反應活性。

二、制備方法

  1. 鏈霉親和素純化:通常通過親和層析技術獲得高純度的鏈霉親和素。

  2. 巰基化試劑的選擇:常用的巰基化試劑包括N-(β-巰基乙基)-N’-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亞胺(EDC)或NHS-巰基(NHS-thiol)。

  3. 化學反應:將鏈霉親和素與巰基化試劑在適宜的溶液體系中反應,pH控制在中性或弱堿性,以確保反應進行并避免非特異性反應。

  4. 反應條件優化:控制反應溫度、時間及試劑的濃度,以促進巰基的引入。

  5. 純化巰基化鏈霉親和素:反應完成后,使用凝膠過濾或親和層析方法純化最終產物,去除未反應的試劑和副產物。

三、功能與應用

  1. 生物偶聯實驗:利用鏈霉親和素-巰基的巰基與修飾有馬來酰亞胺的生物分子或材料進行偶聯,然后借助鏈霉親和素與生物素的結合,實現對目標生物分子的固定、分離或檢測。

  2. 表面修飾:可用于修飾金納米顆粒、電極、微孔板等,通過巰基與金等表面形成穩定的共價鍵,從而改變這些表面的生物相容性和反應性。

  3. 免疫檢測與生物傳感:可與生物素標記物形成高親和力結合,用于ELISA、免疫熒光檢測等。

  4. 藥物遞送:通過巰基-馬來酰亞胺偶聯,可將鏈霉親和素結合到納米顆粒或抗體上,實現靶向藥物遞送。

  5. 納米生物技術:用于金納米粒子、量子點表面的功能化修飾,廣泛用于生物成像和傳感器開發。

四、儲存與使用

  • 儲存條件:鏈霉親和素-巰基應在低溫條件下儲存,如-20°C冷藏保存,以防止巰基氧化和蛋白質變性。

  • 使用范圍:僅用于科研,不能用于人體實驗。

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