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植物脂氧合酶(LOX)ELISA試劑盒實驗使用說明書

  • 資料類型

    doc
  • 文件大小

    16.5KB
  • 瀏覽次數

    150次
  • 上傳時間

    2025年05月26日
關鍵詞
植物脂氧合酶,ELISA試劑盒,LOX 試劑盒,微孔板,HRP標記抗體
上傳者
本生(天津)健康科技有限公司
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資料簡介

  以下是植物脂氧合酶(LOX)ELISA試劑盒的實驗使用說明,綜合了相關檢測原理、操作步驟及注意事項:

  BS-8002 植物脂氧合酶(LOX)ELISA試劑盒

  檢測原理?

  采用雙抗體夾心法:

  微孔板預包被LOX抗體形成固相抗體

  依次加入樣本、HRP標記的檢測抗體,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物

  TMB顯色后,顏色深淺與LOX活性呈正相關,450nm測OD值計算濃度

  試劑盒組成?

  預包被微孔板

  標準品(通常含S0-S5濃度梯度)

  HRP標記抗體、TMB顯色液、終止液

  濃縮洗滌液(需1:20稀釋)

  樣本處理?

  組織樣本?:按1:5~10(質量:體積)加入提取液,冰浴勻漿后4℃ 15000g離心20min取上清

  保存要求?:分裝后-20℃凍存,避免反復凍融;NaN3會抑制HRP活性,需避免使用

  操作步驟?

  標準品稀釋?:按說明書梯度稀釋(如0-320 U/L)

  加樣?:

  分別加入標準品、樣本各50μL至對應孔

  立即加入50μL HRP標記抗體,37℃孵育60min

  洗滌?:手工洗板需加滿洗滌液,靜置1min后甩干,重復5次

  顯色?:

  每孔加TMB底物100μL,37℃避光顯色15-30min

  加終止液50μL,顏色由藍變黃

  檢測?:450nm測OD值,用標準曲線計算樣本濃度

  注意事項?

  試劑使用前需室溫平衡20分鐘,結晶需水浴溶解

  顯色時間需嚴格控制,避免過度反應

  空白孔(S0)作為陰性對照,樣本OD值需在標準曲線范圍內

  結果計算?

  樣本濃度=標準曲線對應濃度×稀釋倍數(若樣本預先稀釋需乘以相應系數)

  如需具體試劑盒的差異步驟,請參考對應產品的說明書。

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