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　　大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書

　　BS-3658   天津本生大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒

　　大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明書主要包括以下內(nèi)容：

　　1. ?實(shí)驗(yàn)原理?

　　該試劑盒采用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠Klotho蛋白(Klotho)水平。通過純化的大鼠Klotho蛋白抗體包被微孔板，形成固相抗體，依次加入Klotho蛋白和HRP標(biāo)記的Klotho蛋白抗體，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過洗滌后，加入底物TMB顯色，顏色深淺與樣品中Klotho蛋白含量呈正相關(guān)。最后用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度?。

　　2. ?試劑盒組成?

　　30倍濃縮洗滌液：20ml×1瓶

　　酶標(biāo)試劑：6ml×1瓶

　　標(biāo)準(zhǔn)品：2瓶

　　稀釋液：1×45mL

　　檢測溶液A：1×120μL

　　檢測溶液B：1×120μL

　　TMB底物：1×9mL

　　終止液：1×6mL

　　96孔板(預(yù)包被)：1塊

　　96孔板覆膜：2張

　　使用說明書：1份?。

　　3. ?樣本處理及要求?

　　血清?：全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜，1000×g離心20分鐘，取上清，避免反復(fù)凍融?。

　　血漿?：使用EDTA或肝素抗凝，采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃離心，取上清?。

　　細(xì)胞上清液?：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒?。

　　組織勻漿?：將組織加入適量生理鹽水搗碎，離心后取上清?。

　　4. ?實(shí)驗(yàn)步驟?

　　加樣：標(biāo)準(zhǔn)品及樣本各50μL，37℃孵育30分鐘?。

　　洗滌：洗板5次，加入酶標(biāo)試劑50μL，37℃孵育30分鐘?。

　　顯色：加入顯色液A、B各50μL，37℃孵育15分鐘?。

　　終止：加入終止液50μL，立即用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度?。

　　5. ?注意事項(xiàng)?

　　試劑盒需在2-8℃保存，開封后酶標(biāo)板需密封保存于-20℃?。

　　實(shí)驗(yàn)過程中需避免樣本反復(fù)凍融，確保操作環(huán)境溫度、濕度一致?。

　　試劑盒有效期一般為6個(gè)月至12個(gè)月，具體以標(biāo)簽為準(zhǔn)?。

　　6. ?適用范圍?

　　該試劑盒適用于體外定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中Klotho蛋白的含量?。

　　以上內(nèi)容綜合了多個(gè)來源的實(shí)驗(yàn)使用說明書，確保實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確性和可靠性?。