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液相色譜儀分析樣品的預處理方法

來源:上海惠分科學分析儀器有限公司   2016年06月25日 15:42  

  液相色譜儀分析樣品的預處理方法有過濾、離心、加速溶劑萃取、超臨界流體萃取、固相萃取、固相微萃取、液相微萃取和衍生化等。

過濾

  常用的濾膜材質有纖維素、聚四氟乙烯和聚酰胺。其中聚酰胺應用zui廣,是親水材料,適合水溶液的過濾,不被HPLC常用溶劑所腐蝕,不含添加劑。

 

加速溶劑萃取

1、原理:

  加速溶劑萃取是在提高溫度(50~200℃)和壓力(10.3~20.6MPa)下,用溶劑萃取固體或半固體樣品。

2、特點:

  與傳統萃取方式相比,加速溶劑萃取具有溶劑用量少、快速、對不同基體可用相同的萃取條件、萃取效率高、選擇性好、使用方便、安全性好和自動化程度高等特點。

 

超臨界流體萃取

  超臨界流體萃取是利用超臨界流體對物質的特殊溶解性能原理而建立的萃取方法。

  超臨界二氧化碳作為常用的萃取劑已被廣泛應用于天然藥物中非極性和弱極性有效成分的提取。

 

固相萃取

1、原理:

  固相萃取是通過采用選擇性吸附和選擇性洗脫對樣品進行富集、分離和凈化,可以將其近似地看作一種簡單的液固色譜過程。

2、固相萃取方法:

(1)使液體樣品溶液通過吸附劑,保留其中被測物質,然后選用適當強度溶劑沖去雜質,再用少量溶劑迅速洗脫被測物質,從而達到快速分離凈化和濃縮的目的。

(2)可選擇性吸附干擾雜質,讓被測物質流出。

(3)可同時吸附雜質和被測物質,再使用合適的溶劑選擇性洗脫被測物質。 

 

固相微萃取

1、原理:

  固相微萃取是基于涂敷在纖維上的高分子涂層或吸附劑和樣品之間的吸附-解吸平衡原理,集采樣、萃取、濃縮和進樣于一體的無溶劑的樣品微萃取方法。

2、常用固相微萃取方法:

(1)直接固相微萃取:適用于氣體基質和干凈的水基質。

(2)頂空固相微萃取:適用于任何基質,尤其是直接固相微萃取的臟水、油脂、血液、污泥和土壤等。

(3)膜固相微萃取:通過選擇性高分子滲透膜將樣品與萃取頭分離,進行間接萃取。滲透膜的作用是使萃取頭不被基質污染,提高萃取的選擇性。但由于樣品中待分析物必須通過滲透膜才可以接觸到萃取涂層,因此會延長萃取平衡時間。可用于懸濁液等較臟基質中非揮發性有機物的監測。

(4)毛細管固相微萃取:將氣體或液體樣品通過內壁鍵合萃取劑的石英毛細管,使待分離組分從樣品中萃取出來,具有富集倍數高和萃取平衡時間短等特點。

3、優點:

(1)集采樣、萃取、濃縮和進樣于一體,操作方便,測定快速。

(2)克服了固相萃取回收率低,吸附劑孔道易堵塞的缺點。

(3)無需任何有機溶劑,是真正意義上的固相萃取,避免了對環境的二次污染。

(4)操作費用更加低廉。

(5)儀器簡單,適合現場分析。

4、缺點:

(1)纖維頭價格較貴且易碎,使用壽命較短。

(2)涂敷在纖維上的高分子涂層或吸附劑在使用過程中會有部分丟失。

(3)纖維頭具有記憶效應,存在交叉污染。

(4)固相微萃取與HPLC聯用時,需要專門的解吸裝置,分析物解吸*需要相當長的時間。

 

液相微萃取

  液相微萃取是基于樣品和微升級甚至納升級有機溶劑之間的分配平衡原理,集采樣、萃取和濃縮于一體的環境友好的樣品微萃取方法,特別適合環境樣品中痕量和超痕量污染物的分析。

1、直接液相微萃取:

(1)原理:

利用懸掛在色譜微量進樣器針頭上的有機溶劑對樣品溶液中的分析物直接進行萃取。

(2)特點:

直接液相微萃取是微型化的液液萃取,克服了傳統液液萃取的諸多不足,僅使用微升級甚至納升級的有機溶劑進行萃取,適應現代分析科學微型化發展的要求,屬于綠色分析技術。但是存在許多缺點。

2、中空纖維液相微萃取:

(1)原理:

以多孔的中空纖維為萃取溶劑的載體而進行微萃取。

(2)特點:

1)成本低,裝置簡單,易與GC、HPLC和CE聯用。

2)由于中空纖維的多孔性,增加了溶劑與樣品的接觸面積,提高了萃取率。

3)由于微萃取是在纖維孔中進行,避免了直接液相微萃取中溶劑易損失的缺點。

4)由于大分子和雜質等不能進入纖維孔,有固相微萃取和直接液相微萃取不具備的凈化功能。

5)中空纖維是一次性使用的,避免了固相微萃取中可能存在的交叉污染問題。

3、頂空液相微萃取:

(1)原理:

把有機溶劑懸于樣品溶液上方而進行微萃取。

(2)特點:

1)頂空液相微萃取中有樣品溶液、有機溶劑和頂空相三相,分析物在三相中的化學勢是推動分析物從樣品溶液進入有機溶劑液滴的驅動力,可以通過不斷攪拌樣品溶液產生連續的新表面來增強這種驅動力。由于揮發性化合物從樣品溶液到頂空相再到有機溶劑,比從樣品溶液直接到有機溶劑的傳質速度快的多,所以對于水中的揮發性有機物,項空液相微萃取比直接液相微萃取更快捷。

2)直接液相微萃取在萃取樣品時,不可避免的會在有機溶劑液滴外成一層穩定的擴散層,這樣會阻礙分析物向有機溶劑液滴的擴散,而頂空液相微萃取克服了這一局限,且由于分析物在氣相中的擴散系數是其在液相中的104倍,對于擴散系數較大的揮發性有機物,項空液相微萃取大大縮短了到達平衡所需的時間,同時還可以極其有效地消除樣品基質的干擾,因此,一般情況下被優先采用。

(3)應用:

適用于分析物容易進入樣品溶液上方空間的揮發性和半揮發性有機物。

 

衍生化

1、紫外衍生化:

為使沒有紫外吸收或紫外吸收很弱的化合物能被紫外檢測器檢測,往往通過衍生化反應在這些化合物的分子中引入強紫外吸收的基團。

2、熒光衍生化:

熒光衍生化已廣泛應用于醇、酸、糖、雌激素和生物堿等檢測,其中在氨基酸樣品檢測中應用zui多。

3、電化學衍生化:

使樣品組分與衍生化試劑反應,生成具有電化學活性的衍生物,以便對電化學檢測有較靈敏的響應。

 

(來源:分析測試百科網)

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