1 主題內(nèi)容與適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了出口蜂蜜中殺蟲脒殘留量檢驗(yàn)的抽樣、制樣和氣相色譜測(cè)定方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于出口蜂蜜中殺蟲脒殘留量的檢驗(yàn)。

2 抽樣和制樣

2.1 檢驗(yàn)批
以不超過 1000件為一個(gè)檢驗(yàn)批。同一檢驗(yàn)批的商品應(yīng)具有相同的特征,如包裝、標(biāo)記、產(chǎn)地、規(guī)格、等級(jí)等。
2.2 抽樣數(shù)量
批量(件) zui低抽樣數(shù)(件)
50以內(nèi) 5
50～100 10
101～500 每增加100,增取5
501以上 每增加 100,增取2
2.3 抽樣工具
2.3.1 取樣管：不銹鋼管,長約115cm,直徑約2.5cm。
2.3.2 混樣器：搪瓷桶(或杯)。
2.3.3 單套桿：不銹鋼制。
2.3.4 樣品瓶：500mL磨砂蓋廣口玻璃瓶。
2.4 抽樣方法
按 2.2規(guī)定的抽取件數(shù)隨機(jī)抽取,逐件開啟。將取樣管緩緩放入,吸取樣品,如遇蜂蜜結(jié)晶時(shí),則用單套桿插到底,抽取樣品。每件抽取樣品不少于100g,作為原始樣品。將所取樣品傾入混樣器,混和均勻,裝入清潔干燥的樣品瓶?jī)?nèi),封口后,標(biāo)明標(biāo)記并及時(shí)送實(shí)驗(yàn)室。
2.5 試樣制備
對(duì)未結(jié)晶的樣品將其用力攪拌均勻,對(duì)有結(jié)晶析出的樣品可將樣品瓶蓋塞緊后,置于不超過60℃的水浴中溫?zé)?俟樣品全部融化后攪勻,迅速冷卻至室溫。在融化時(shí)必須注意防止水分揮發(fā)。制備好的試樣置于樣品瓶中,密封,并標(biāo)明標(biāo)記。
2.6 試樣保存
將試樣于室溫下保存。
注：在抽樣和制樣的操作過程中,必須防止樣品污染或發(fā)生殘留物含量的變化。

3 測(cè)定方法

3.1 方法提要
蜂蜜中殘留的殺蟲脒［N-(4-氯-鄰甲苯基)-N',N'-二甲基甲脒C10H13N2Cl］在丙酮?dú)溲趸c溶液中用正已烷提取,提取液經(jīng)堿－正已烷、酸－正已烷液液分配法凈化后,以氣相色譜儀氮磷檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),以二苯胺作內(nèi)標(biāo)進(jìn)行定量。
3.2 試劑和材料
除特殊規(guī)定外試劑均為分析純,水為蒸餾水或相適應(yīng)的去離子水。
3.2.1 丙酮：重蒸餾。
3.2.2 正已烷：加堿重蒸餾。
3.2.3 氫氧化鈉溶液：1mol/L。
3.2.4 氫氧化鈉溶液：0.5mol/L。
3.2.5 鹽酸溶液：0.1mol/L。
3.2.6 內(nèi)標(biāo)溶液：二苯胺－正已烷溶液：0.500μg/mL。
3.2.7 殺蟲脒標(biāo)準(zhǔn)品：純度＞99%。
3.2.8 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：稱取約40.0mg殺蟲脒標(biāo)準(zhǔn)品,至0.1mg,于100mL容量瓶中,用正已烷溶解并定容作為貯備液,濃度為0.400mg/mL。再用正已烷定量稀釋并定量加入內(nèi)標(biāo)物二苯胺,制得標(biāo)準(zhǔn)工作液。其中殺蟲脒濃度約為0.200μg/mL或與樣液中殺蟲脒濃度相近,二苯胺濃度約為0.500μg/mL。新鮮配制。
3.3 儀器和設(shè)備
3.3.1 氣相色譜儀并配有氮磷檢測(cè)器。
3.3.2 積分儀或記錄儀。
3.3.3 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。
3.3.4 微量注射器：10μL。
3.4 測(cè)定步驟
3.4.1 提取
稱取約20g試樣,至0.1g,于100mL燒杯中,加入30mL1mol/L氫氧化鈉溶液,攪拌溶解,再加50mL丙酮,攪勻后倒入250mL分液漏斗中。用數(shù)毫升丙酮洗滌燒杯二次,并入上述分液漏斗中,并繼加50mL正已烷,劇烈振搖2min。靜置加層后,保留上層正已烷溶液,棄去下層或下層及中層液。
3.4.2 凈化
將上述正已烷溶液先后以30mL,20mL0.5mol/L氫氧化鈉溶液各洗滌一次,棄去氫氧化鈉洗滌液。在正已烷中加入20mL0.1mol/L鹽酸溶液,劇烈振搖2min,靜置分層。將下層鹽酸溶液放入另一250mL分液漏斗。于正已烷液中再加入10mL0.1mol/L鹽酸溶液,劇烈振搖2min,靜置分層,合并鹽酸溶液于同一分液漏斗中,并棄去正已烷層。在鹽酸溶液中,加入30mL1mol/L氫氧化鈉溶液,再加入60mL正已烷,劇烈振搖2min,靜置分層。棄去全部水層。將正已烷溶液從分液漏斗上口倒入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器的蒸發(fā)瓶?jī)?nèi),并用數(shù)毫升正已烷洗滌分液漏斗二次,合并洗滌液于同一蒸發(fā)瓶?jī)?nèi)。在45℃水浴中減壓濃縮至近干。定量加入1.00mL0.500μg/mL二苯胺－正已烷溶液,溶解殘?jiān)?所制成樣液供氣相色譜測(cè)定。
3.4.3 測(cè)定
3.4.3.1 色譜條件
a. 色譜柱：玻璃柱,2m×3mm(內(nèi)徑),填充物為6%(m/m)SE-54涂于 ChromosorbWHP(80～100目)?；蛱畛湮餅?5%(m/m)SE-30涂于 ChromosorbWHP(80～100目),加0.6%(m/m)KOH;
b. 氮?dú)猓杭兌?ge;99.99%,60mL/min;
c. 氫氣：2.5mL/min;
d. 空氣：170mL/min;
e. 柱溫：198℃;
f. 進(jìn)樣口溫度：250℃;
g. 檢測(cè)器溫度：250℃;
h. 銣珠電壓：6.8×2V。
3.4.3.2 色譜測(cè)定
分別將標(biāo)準(zhǔn)工作溶液、樣液注入氣相色譜儀,進(jìn)樣量：各2μL。出峰保留時(shí)間：二苯胺約為3.8min;殺蟲脒約為4.4min。
3.4.4 空白試驗(yàn)：除不加試樣外,按上述測(cè)定步驟進(jìn)行。
3.5 結(jié)果的計(jì)算及表述
用色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)按內(nèi)標(biāo)法計(jì)算或按下式計(jì)算：
Cs·A·Asi·mi
X=────────-
Csi·Ai·As·m
式中：X——蜂蜜樣品中殺蟲脒含量,mg/kg;
Cs——標(biāo)準(zhǔn)工作液中殺蟲脒濃度,μg/mL;
Csi——標(biāo)準(zhǔn)工作液中二苯胺濃度,μg/mL;
A——樣液中殺蟲脒色譜峰面積,mm**2;
Ai——樣液中二苯胺色譜峰面積,mm**2;
As——標(biāo)準(zhǔn)工作液中殺蟲脒色譜峰面積,mm**2;
Asi——標(biāo)準(zhǔn)工作液中二苯胺色譜峰面積,mm**2;
mi——樣液中二苯胺總添加量,μg;
m——蜂蜜試樣總量,g。
注：計(jì)算結(jié)果須扣除空白值。

4 方法的測(cè)定低限、回收率

4.1 測(cè)定低限
本方法的測(cè)定低限為0.005mg/kg。
4.2 回收率
回收率實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：
殺蟲脒濃度在 0.005～0.100mg/kg范圍,回收率為89.8%～100.5%。


附加說明：
本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國國家進(jìn)出口商品檢驗(yàn)局提出。
本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國上海進(jìn)出口商品檢驗(yàn)局負(fù)責(zé)起草。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人葛修麗、蔡則慈。
主要參考文獻(xiàn)
Dr.Wiertz,KurzerAbri β derMethode-ChlordimeforminHonig