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測序常見問題及其分析

來源:上海士鋒生物科技有限公司   2016年04月26日 05:57  

1、PCR 產物測序時出現重疊峰

問題圖1(模板中有堿基缺失,往往是單一位點(1-1)或兩個位點(1-2)堿基缺失導致測序
結果移碼)
圖1-1
測序常見問題及其分析

解決方法:將PCR 產物克隆到質粒(如T 載體)中挑單克隆測序,或將PCR 產物進行page
純化(至少瓊脂糖充分電泳后切膠純化)后再進行測序。
問題圖2(PCR 產物不純,含部分序列一致的兩種以上的片段,長度不一)
圖2
測序常見問題及其分析

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