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兔白ELISA試劑盒細胞介素12(IL-12)酶聯免疫分析

來源:上海研域商貿有限公司   2016年04月18日 09:00  

使用目的:
本試劑盒用于測定兔血清、血漿及相關液體樣本中白細胞介素 12(IL-12)含量。
兔白ELISA試劑盒細胞介素12(IL-12)酶聯免疫分析實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔白細胞介素 12(IL-12)細胞介素 12(IL-12)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介素 12(IL-12),再與 HRP標記的白細胞介素  12(IL-12)抗體    ,形成抗體-抗原-酶。用純化的兔白標抗體復合物,經過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素 12(IL-12)呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中兔白細胞介素 12(IL-12)濃度。
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因   NaN3抑制辣根過(HRP)活性。
兔白ELISA試劑盒細胞介素12(IL-12)酶聯免疫分析操作步驟
1.  標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.  加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
10.終止:每孔加終止液    50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止液后 15分鐘以內進行。
操作程序總:
計算以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與  OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
兔白細胞介素12(IL-12)酶聯免疫分析注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有析出,稀釋時可在浴中加溫助溶,洗滌時不影響。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本  OD值大于標準品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
兔白細胞介素12(IL-12)酶聯免疫分析保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月

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