觸摸屏梯度PCR儀設計程序
1、常規PCR反應:
出現主菜單后,按standard或new方式編制要運行的PCR程序,在輸入預變性的溫度及時間、變性的溫度及時間、退火的溫度及時間、延伸的溫度及時間、Sock的溫度后,按start/stop鍵開始啟動運行當前程序。
如果設計程序時選擇了CNTRL/TUBE命令,則程序啟動后需要輸入反應管的相應型號和樣品體積。
——用SEL鍵選擇反應管的型號,用ENTER鍵確認。
——輸入溶液體積,用Enter鍵確認。
——當程序運行時,按Opt鍵可以顯示大概的運行時間和預期結束的時間。
2、觸摸屏梯度PCR儀反應:
開機后按照常規PCR反應設置程序,按控制面板上的四個方向選擇鍵將閃爍的光標移至程序退火這一步的數字序號處(一般為3),按住控制面板上的OPTIONS鍵,則進入溫度梯度程序設計。
按方向選擇鍵將光標移至G=0.0°(輸入數值范圍0-12),一旦輸入這個數值,即對樣品槽的每一列設定了不同的溫度,預設的溫度在樣品槽的中間,沿著樣品槽從做至右溫度依次升高。用0.2ml的管可設置12個不同的溫度,用0.5ml的管則可設置11個不同的溫度。在Option/Gradient中查看溫度分布。反應槽zui高溫度不能超過99℃。
3、其它參數設置及說明:
——T輸入溫度、循環次數、以及相關選項。
——±0.0°溫度變異量(±0.0°):每一個循環溫度增加或減少的量。必須注意溫度不能超過99℃。例如,變異量是+0.1℃,25個循環,則起始溫度不能超過96.5℃。先輸入數值,然后輸入加減號。+:溫度上升;-:溫度下降。
——±0.00時間變異量(±S):輸入每個循環時間的增加或減少(zui大為1分鐘)
——R=3.0°/SRamp(K/S)代表了一個循環曲線的升降溫速率。這個值越高,則加熱或降溫就越快。允許值范圍:0.3-3.0K/S。
——±0.0°/SRampincrement(±S):輸入升降溫速率的變異量。該速率不能超過3K/S,因此,如果起始速率為0.3,變異量為0.1,則zui大循環次數為27個。
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