成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養箱


化工儀器網>技術中心>其他文章>正文

歡迎聯系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

培養細胞染色體顯示法

來源:上海索寶生物科技有限公司   2016年03月16日 09:40  

1、植物組織蛋白質提取方法
1、根據樣品重量(1g樣品加入3.5ml提取液,可根據材料不同適當加入),準備提取液放在冰上。
2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上靜置(3-4小時)。
3、用離心機離心8000rpm40min411100rpm20min4
4、提取上清夜,樣品制備完成。
蛋白質提取液:300ml
1
1Mtris-HClPH8 45ml
2
、甘油(Glycerol75ml
3
、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinylpolypyrrordone6g
這種方法針對SDS-PAGE,垂直板電泳!

2、植物組織蛋白質提取方法 
三氯醋酸丙酮沉淀法
1、在液氮中研磨葉片
2、加入樣品體積3倍的提取液在-20的條件下保存12小時,然后離心(48000rpm以上1小時)棄上清。
3、加入等體積的冰浴丙酮(含0.07%β-巰基乙醇),搖勻后離心(48000rpm以上1小時),然后真空干燥沉淀,備用。
4、上樣前加入裂解液,室溫放置30分鐘,使蛋白充分溶于裂解液中,然后離心(158000rpm以上1小時或更長時間以沒有沉淀為標準),可臨時保存在4待用。
5、用Brandford法定量蛋白,然后可分裝放入-80備用。
藥品:
提取液:含10%TCA0.07%β-巰基乙醇的丙酮
裂解液:2.7g尿素0.2gCHAPS溶于3ml滅菌的去離子水中(終體積為5ml),使用前再加入1MDTT65ul/ml
這種方法針對雙向電泳,雜質少,離子濃度小的特點!當然單向電泳也同樣適用,只是電泳的條帶會減少!

3、組織:腸黏膜 
目的:WESTERN BLOT檢測凋亡相關蛋白的表達
應用TRIPURE提取蛋白質步驟:
含蛋白質上清液中加入異丙醇:(1.5ml1mlTRIPURE用量)
倒轉混勻,置室溫10min
離心:12000 g10min4度,棄上清
加入0.3M鹽酸胍/95%乙醇:(2ml1mlTRIPURE用量)
振蕩,置室溫20min
離心: 7500g5 min4度,棄上清
重復0.3M鹽酸胍/95%乙醇步2
沉淀中加入100%乙醇 2ml
充分振蕩混勻,置室溫20 min
離心: 7500g5min4度,棄上清吹干沉淀
1SDS溶解沉淀
離心:10000g10min4
取上清-20度保存(或可直接用于WESTERN BLOT
存在的問題:加入1SDS后沉淀不溶解,還是很大的一塊,4度離心后又多了白色沉定,SDS結晶?測濃度,含量才1mg/ml左右。
解決:提蛋白試劑盒,另外組織大小適中,要碎,立即加2X BUFFER,然后煮510分鐘,效果很好的。

4、植物材料:水稻苗,葉鞘,根
1200毫克樣品置于冰上磨碎
2、加lysis buffer,離心,10000rpm4度,5min取上清
3、重復離心5min
lysis buffer
urea   np-40  ampholine 2-me  pvp-40

5、蛋白質樣品制備
秧苗蛋白質樣品的提取按Davermal等(1986)的方法進行。
100mg材料剪碎后加入10mgPVP-40(聚乙烯吡咯烷酮)及少量石英砂,用液氮研磨成粉,加入1.5 ml 10% Trichloroacetic acid(丙酮配制,含10mM0.07%β-巰基乙醇),混勻,-20沉淀1小時,415000 r/min離心15 min,棄上清,沉淀復溶于1.5ml冷丙酮(10 mMβ-巰基乙醇),再于-20沉淀1小時,同上離心棄上清,(有必要再用80%丙酮(10 mMβ-巰基乙醇所得沉淀低溫冷凍真空抽干。
按每mg干粉加入20μl(可調) UKS[9.5 M尿素,5mM碳酸鉀,1.25%SDS0.5%DTT(二硫蘇糖醇)2% Ampholine (Amersham Pharmacia Biotech IncpH3.5-10)6% Triton X-100]37溫育30min,期間攪動幾次,28 (溫度低,高濃度的尿素會讓溶液結冰)16000 r/min離心15 min,離心力越大時間長一點越好!上清即可上樣電泳。或者-70度保存

6、植物根中蛋白質的抽取
(1) sample, 液氮研磨
(2) 1.5 ml centrifuge tube
(3)
1M KH2PO4+K2HPO4 700 ul
(4) 12000 rpm, 4
, 10-15minite
(5)
取上層液,蛋白質就在里面 

 

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。
企業未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
主站蜘蛛池模板: 黄色软件在线看| 99国产精品人妻无码网站| 97国产在线观看| 午夜福利免费0948视频| 日本VA欧美VA精品发布| 婷婷综合亚洲爱久久| 丰满人妻妇伦又伦精品APP国产| 亚洲另类色区欧美日韩| 国产SUV精品一区二区| 亚洲国产AV一区二区三区四区| 极品夜夜嗨久久精品17c| 麻豆传煤网站入口下载| 亚洲国产欧洲综合997久久| 欧美日韩亚洲视频一区| 男人天堂成人av| 69精品久久久久久| 欧美一区二区三区久久综合| 国产真人无码AV在线观看APP| 情侣黄网站免费看| 亚洲欧美日韩精品久久亚洲区| 精品亚洲国产熟女福利自在线| 日韩欧美精品人妻二区少妇| 亚洲精品无码一区二区| 偷拍亚洲制服另类无码专区| 欧美日韩免费高清大片| 91九色成人porny| 欧美激情无码视频一二三| 少妇性夜夜春夜夜爽A片| 精品国产久线观看视频| 亚洲精品无码久久久久秋霞| 国产精品久久无码人妻一区二区| 性变态暴力整夜惨叫小说| 欧美日韩视频在线免费观看| 国产欧美一区二区日韩| WWW亚洲精品久久久| 中文人妻av一区二区三区| 公么的粗大满足了我好爽| 女人被公牛进入| 色护士极品影院| 强壮公弄得我次次A片| 午夜理论在线观看不卡大地影院|