研究結果對指導我們下一步把研究結果推向臨床應用有積極的作用,并對干細胞治療其他疾病和走上臨床應用提ELISA試劑盒供了有益的借鑒。
本研究中,我們以脂肪來源的干細胞(ADSCs)作為供體細胞,利用RCS大鼠為視網膜變性的模型,開展了視網膜下腔移植干預治療研究。ADSCs來自臨床經知情同意后患者廢棄的脂肪組織并經過必要的分離純化,并在不同時間點對ADSCs的干預效果進行臨床判定,包括ERG檢查確認細胞移植對大鼠視功能的改善情況。本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人 S100B蛋白(S-100B)水平。用純化的人S100B蛋白(S-100B)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入 S100B蛋白(S-100B),ELISA試劑盒再與 HRP標記的 S100B蛋白(S-100B)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的 S100B蛋白(S-100B)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人 S100B蛋白(S-100B)濃度。
同時,對移植后細胞的存活、遷移、組織整合、細胞分化、細胞因子分泌等指標及其對視網膜組織和細胞影響進行判定。結果表明,ELISA試劑盒ADSCs對RCS大鼠視網膜有明顯的保護作用并對其視功能有支持和重建作用。同時,對ADSCs治療視網膜變性作用的機制進行了分析探討。
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