檢測原理: 本實驗采用雙抗體夾心ELISA法。抗人IL-4單抗包被于酶標板上，標本和標準品中的IL-4會 與單抗結合，游離的成分被洗去。小鼠ELISA試劑盒加入生物素化的抗人IL-4抗體和辣根過氧化物酶標記的親 和素。生物素與親和素特異性結合；抗人IL-4抗體與結合在單抗上的人IL-4結合而形成免疫 復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應孔中有IL-4，辣根過氧化物酶會使無色 的顯色劑現藍色，加終止液變黃。在450nm處測OD值，IL-4濃度與OD450值之間呈正比，可 通過繪制標準曲線求出標本中IL-4的濃度。
小鼠ELISA試劑盒檢測前準備工作: 
1. 請提前20分鐘從冰箱中取出試劑盒，以平衡至室溫。 2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋（1:20）。未用完的放回4℃。 3. 標準品: 加入標準品/標本稀釋液0.5ml至凍干標準品中，靜置15分鐘，待其充分溶解后，輕輕混勻（濃度為1000 pg/ml）。然后根據需要進行稀釋。（建議標準曲線使用以下濃度： 1000、500、250、125、62.5、31.25、15.6、0 pg/ml）。復溶標準品原液（1000 pg/ml）若未用完請分裝后放入-20℃以下電冰箱內保存，保存兩個月。已稀釋的標準品請廢棄。 4. 生物素化抗體工作液：按當次試驗所需要得用量，使用前20分鐘，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體（1:30）成工作濃度。當日使用。ELISA試劑盒若實驗次數過多導致生物素化 抗體量不足，可向我們公司單獨購買生物素化抗體。 5. 酶結合物工作液：按當次試驗所需要得用量，使用前20分鐘，以酶結合物稀釋液稀釋濃 縮酶結合物（1:30） 成工作濃度。當日使用。若實驗次數過多導致濃縮酶結合物量不足， 可向我們公司單獨購買濃縮酶結合物。