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液相色譜儀溶劑的選擇與優化——紫外截止波長

來源:山東滕州市魯創分析儀器有限公司   2015年12月26日 14:42  

       由于液相色譜儀應用zui多的檢測器是紫外檢測器,用于檢測具有紫外吸收的樣品。紫外檢測器靈敏度高,不破壞樣品,能與其他檢測器有串聯,也可用于制備;對溫度及流動相流速波動不敏感,可用于梯度洗脫。但只能檢測具有π-π或p-π共軛結構的化合物。
       使用紫外檢測器時應考慮溶劑的截止波長。例如,當檢測波長為220nm時,只能選用小于此截止波長的溶劑,如正戊烷、水、甲醇、乙腈等溶劑,而不能用截止波長小于220nm的溶劑,如二氯甲烷、氯仿等。
       紫外截止波長定義為:“以空氣作為參考物,在1cm 吸收池內溶劑測得與參照物相等吸收的吸收波長”。
       當某溶劑在流動相中占較小比例時則應根據具體情況決定。如濃度為10%(體積分數)或更低的溶液在截止波長附近檢測僅會有一個0.1AU(吸收單位)的背景吸收。除了隨之產生的噪聲水平增加,線性工作范圍減小和穩定性變差外,多數情況是可以接受的。
       應該值得重視的是,不同液相色譜儀廠家不同批號溶劑的光譜特性可能存在明顯的差異。由于雜質種類和含量的區別,紫外截止波長及吸收系數都會有差異。空氣中氧氣溶解量的區別會明顯產生不同的基線噪聲。因此,除了盡可能使用符合色譜標準的溶劑外,液相色譜儀的溶劑使用前應該仔細過濾,用超聲脫氣,甚至用吹氦氣的方法處理,以盡量去除雜質以及可揮發的溶解氣體。

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