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液相色譜儀溶劑的選擇與優(yōu)化——紫外截止波長(zhǎng)

來源:山東滕州市魯創(chuàng)分析儀器有限公司   2015年12月26日 14:42  

       由于液相色譜儀應(yīng)用zui多的檢測(cè)器是紫外檢測(cè)器,用于檢測(cè)具有紫外吸收的樣品。紫外檢測(cè)器靈敏度高,不破壞樣品,能與其他檢測(cè)器有串聯(lián),也可用于制備;對(duì)溫度及流動(dòng)相流速波動(dòng)不敏感,可用于梯度洗脫。但只能檢測(cè)具有π-π或p-π共軛結(jié)構(gòu)的化合物。
       使用紫外檢測(cè)器時(shí)應(yīng)考慮溶劑的截止波長(zhǎng)。例如,當(dāng)檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm時(shí),只能選用小于此截止波長(zhǎng)的溶劑,如正戊烷、水、甲醇、乙腈等溶劑,而不能用截止波長(zhǎng)小于220nm的溶劑,如二氯甲烷、氯仿等。
       紫外截止波長(zhǎng)定義為:“以空氣作為參考物,在1cm 吸收池內(nèi)溶劑測(cè)得與參照物相等吸收的吸收波長(zhǎng)”。
       當(dāng)某溶劑在流動(dòng)相中占較小比例時(shí)則應(yīng)根據(jù)具體情況決定。如濃度為10%(體積分?jǐn)?shù))或更低的溶液在截止波長(zhǎng)附近檢測(cè)僅會(huì)有一個(gè)0.1AU(吸收單位)的背景吸收。除了隨之產(chǎn)生的噪聲水平增加,線性工作范圍減小和穩(wěn)定性變差外,多數(shù)情況是可以接受的。
       應(yīng)該值得重視的是,不同液相色譜儀廠家不同批號(hào)溶劑的光譜特性可能存在明顯的差異。由于雜質(zhì)種類和含量的區(qū)別,紫外截止波長(zhǎng)及吸收系數(shù)都會(huì)有差異。空氣中氧氣溶解量的區(qū)別會(huì)明顯產(chǎn)生不同的基線噪聲。因此,除了盡可能使用符合色譜標(biāo)準(zhǔn)的溶劑外,液相色譜儀的溶劑使用前應(yīng)該仔細(xì)過濾,用超聲脫氣,甚至用吹氦氣的方法處理,以盡量去除雜質(zhì)以及可揮發(fā)的溶解氣體。

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