熒光定量檢測試劑盒在特殊領(lǐng)域的應(yīng)用推廣
熒光定量檢測試劑盒用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法。熒光定量檢測試劑盒應(yīng)用親和素和生物素的ELISA試劑盒,親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個分子由4個亞基組成,可以和4個生物素分子親密結(jié)合。現(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的熒光定量檢測試劑盒。生物素又稱維生素H,分子量244.31,存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物,熒光定量檢測試劑盒可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素醫(yī)學教育網(wǎng)整理化的產(chǎn)物。
熒光定量檢測試劑盒報價也是相當?shù)牡汀S?.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。熒光定量檢測試劑盒在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每 次3分鐘。加樣:往熒光定量檢測試劑盒加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然 后洗滌。加酶標抗體:熒光定量檢測試劑盒于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37 ℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。結(jié)果判定:可于白色背景上,熒光定量檢測試劑盒可直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強 ,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在 ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大 于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
以上特性來看,針對購買熒光定量檢測試劑盒報價合情合理,親和素與生物素的結(jié)合,雖不屬免疫反應(yīng),但特異性強,親和力大,兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于1個親和素分子有4個 生物素分子的結(jié)合位置,可以連接更多的生物素化的分子,形成一種類似晶格的復合體。熒光定量檢測試劑盒具有性、靈敏性、特異性、重復性和可靠性等特點,主要用于科研和定量檢測細胞液、體液 、組織、血清、血漿等標本中豬內(nèi)皮素1(ET-1)含量。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤 標志物和特種蛋白等的檢測的血清標本的收集則沒有時間和體位方面的影響。熒光定量檢測試劑盒的細胞培養(yǎng)上清:熒光定量檢測試劑盒檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左 右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸 液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,熒光定量檢測試劑盒以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘 左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
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