會(huì)使紫外-可見分光光度計(jì)不準(zhǔn)確的因素
當(dāng)以空白試劑為參比調(diào)節(jié)儀器零點(diǎn)時(shí),比色皿窗材料的吸收、內(nèi)外窗面的散射以及溶劑的吸收等都被抵消,所得吸光度值*由顯色溶液中待測(cè)離了濃度所決定。此時(shí)吸光度值與試液濃度一般呈線性關(guān)系。吸光度值與測(cè)定濃度不成直線關(guān)系,發(fā)牛向下彎曲(負(fù)偏離)或向上彎曲(正偏離)的現(xiàn)象而偏離朗伯一比爾定律的主要原因如下。
(1)非單色光的影響 紫外一可見分光光度訃使用連續(xù)光源和分光器分光,不可能得到真正理想的單色光;為保證在測(cè)量中能得到充分的光強(qiáng),儀器必須保持一定的狹縫寬度。由狹縫射出后投射到被測(cè)物質(zhì)上的光,是一個(gè)有限寬度的譜帶——光譜通帶。隨光譜通帶寬度的增大,吸收光譜的分辨率降低,并偏離朗伯一比爾定律。
(2)非吸收光的影響 當(dāng)來自出射狹縫的光的光譜通帶寬度大于吸收光譜譜帶時(shí),投射在被測(cè)物質(zhì)上的光就含有非吸收光。這不僅能使靈敏度降低,且能使校準(zhǔn)曲線向橫坐標(biāo)軸彎曲而偏離朗伯一比爾定律。
(3)非平行光的影Ⅱ向 當(dāng)入射光與比色皿的光學(xué)面不垂直時(shí),通過被測(cè)物質(zhì)的實(shí)際光程就大于比色皿的厚度。這種情況所造成的影響很小,一般可忽略不計(jì)。
(4)散射的影響 當(dāng)被測(cè)物質(zhì)不均勻,其巾含有微小顆粒物,如懸浮物或膠態(tài)粒子等散射質(zhì)點(diǎn)時(shí),入射光通過該物質(zhì)就會(huì)使部分光被散射而損失,從而減小了透射光的性度,增大了實(shí)際吸光度,導(dǎo)斂偏離朗伯一比爾定律。
(5)熒光的影響某些物質(zhì)吸收光后能再新輻射出波長和入射光波長相近的熒光而導(dǎo)致朗們一比爾定律失效。
(6)化學(xué)反應(yīng)的影響 在被測(cè)溶液中待測(cè)組分發(fā)發(fā)生解離、締合、光化等作用,或與溶劑相互作都將使待測(cè)組分的吸收曲線發(fā)生明顯的改變,如吸收峰的形狀、位置、強(qiáng)度以及精密結(jié)構(gòu)都會(huì)發(fā)生變化,從而導(dǎo)致偏離朗伯一比爾定律。
(7)溶劑的影響 溶劑對(duì)吸收光潛的影響頗為zui要。輔射能引起某化合物的分解而導(dǎo)致偏離朗們比爾定律。
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