成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養箱


化工儀器網>技術中心>其他文章>正文

歡迎聯系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

實驗過程中抗體選擇指導

來源:上海嶸崴達實業有限公司   2015年08月06日 10:50  

實驗過程中抗體選擇指導

抗體選擇指南
 
檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,為縮小抗體的選擇范圍選中合適的抗體,需要考慮如下幾種因素:
 
(1) 分析或應用的類型
 
(2)樣本蛋白的結構性質
 
(3)樣本的種屬
 
(4)抗體宿主的種類
 
(5)抗體的標記和檢測
 
1 分析試驗的應用類型一般抗體說明書都列出該抗體經試驗驗證過適用于何種分析類型,如:
 
可以應用于WB IHC ICC ELASA 分析等,如果抗體說明書沒有提及的應用類型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應用類型,而僅是說明尚未經過此種分析試驗驗證,如果抗體不適用某些分析試驗,則會在抗體說明書上標注出來不適于某分析試驗。
 
2 樣本蛋白的結構性質了解樣本蛋白的結構性質有助于選擇zui合適的抗體,至少需要考慮兩方面因素
 
(1).. 待測樣本蛋白的結構域:抗體是由各種不同免疫原免疫宿主而制備得來,其中的免疫原包括:全長蛋白、蛋白片斷、多肽、全有機體(如:細菌)或細胞,抗體說明 書一般都有免疫原的描述,如果打算檢測的是蛋白片斷或一種特殊的同型物或蛋白全長的某一區域,則必須選擇用含此片段域的免疫原制備出的抗體。如果打算用 FACS 流式檢測活細胞的表面蛋白,則需要選擇含該表面蛋白的胞外域來免疫制備的抗體。
 
(2)樣本的提取或處理過程:某些抗體要求樣本經過某些特殊處理,例如:許多抗體只識別還原和變性的、表位已暴露不受二級四級結構阻礙的蛋白樣本,另一方面,某些抗體僅識別天然折疊狀態的蛋白。
 
當 選擇免疫組化的抗體時,應注意某些抗體只識別未固定的冷凍的組織,而另一些抗體則適用于無需抗原修復解交聯步聚的甲醛固定石蠟包埋的組織,這些都會在抗體 說明書上應用部分標示出來 3 樣本的物種 應選擇物種相同或有交叉反應的抗體,抗體可能與不同物種的同種靶蛋白有交叉反應,因其氨基酸序列同源性較高。
 
如果樣本的種類未列入抗體說明書上的交叉反應種屬表中,并不意味著該抗體不適用于檢測該物種的蛋白,而只是表示該物種尚未用此抗體檢測驗證過,應通過序列比對的方法來預測交叉反應,可應用Expasy 和 NCBI BLAST 來進行不同物種蛋白同源性比對。
 
4 一抗宿主物種的選擇一般說來,在使用偶聯二抗結合無偶聯物的一抗時,一抗宿主動物的物種選擇較為重要,對于免疫組化而言,盡可能選擇與樣本不同種系物種的一抗,從而避免二抗與樣本內源性免疫球蛋白產生交叉反應,
 
例 如:檢測小鼠樣本蛋白,則不應選擇小鼠或大鼠源的一抗,選兔源的一抗,則二抗則可選擇偶聯了檢測分子(酶、熒光素、生物素等)的抗兔IgG。如果選擇 有偶聯物的一抗則不適用上述情況,除免疫組化外的其它對不含內源性免疫球蛋白樣本的檢測方法,則抗體宿主物種的影響不大,如對不含IgG 的細胞裂解物樣 本的western blotting檢測。
 
盡管如此,含有血清的組織裂解物和組織培養上清中含有免疫球蛋白,還原變性樣本中含IgG,在western blot 檢測中則結合出現IgG 分子50 and 25 kDa 的重鏈和輕鏈條帶。
 
5 二抗的選擇 二抗應選用與使用的一抗相同的物種來源,例如:如果你的一抗是小鼠的單克隆抗體,二抗則選抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建議檢查二抗說明書確保該抗體適用于你的檢測應用, 二抗一般連接熒光素FITC 或發光團。
 
6 雙重染色抗體的選擇用未偶聯一抗進行細胞培養物或組織切片的雙重免疫染色要求一抗來源于不同物種并且二抗分別識別其中之一,二抗說明書應描述其與其它物種來源的免疫球蛋有否有交叉吸附。

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。
企業未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
主站蜘蛛池模板: 欧美国产综合日韩一区二区| 亚洲国产二三区天堂| 成人国产欧美大片一区| 婷婷激情综合色五月久久| 扒开女人下面使劲桶动态图| 麻豆影视国产TV在线观看| 色综合久久精品亚洲国产消防| 欧美精品在线一区| 老子影院我不卡午夜理论| 韩国午夜理伦三级| 亚洲精品久久YY5099| 日韩中文字幕视频在线播放| 成人网在线| 无码欧美激情性做爰免费| 国模的国模粉嫩露出毛图片| 一本无码人妻在中文字幕免费| 大香蕉在线网站| 日日鲁鲁鲁夜夜爽爽狠狠| 国产精品久久毛片A片软件爽爽| 黄录像欧美片在线观看| 好男人社区神马在线观看WWW| 欧美一级片黑寡妇| 香蕉视频色版在线观看| 欧美日韩国产一线| 国产精品麻豆一区二区三区| 亚洲中文国产字幕| 国产目拍亚洲精品一区二区| 国产露脸无套对白在线播放| 日本欧美国产精品一区二区| 亚洲欧美综合国产精品二区| 亚洲区偷拍自拍29P| 中文字幕在线日韩一区| 神马电影伦理在线观看线看| 九九久久这里只有精品| 在线国产视频观看| 色-情-伦-理一区二区三区电影| 国产日韩欧美亚洲| 色情无码中文欧美电影| 国产精品爱久久久久久久电影| 日本无码不遮挡又黄大尺度电影| 黑料不打烊,万里长征hl155.ccm|