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基因組DNA提取技術服務|實驗技術服務

來源:上海乾思生物科技有限公司   2015年08月01日 15:19  

關鍵詞:基因組DNA提取技術服務|實驗技術服務
簡介:世界*品牌基因組DNA提取技術服務|實驗技術服務原裝,質量保證,*。
基因組DNA提取技術服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數據真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,客戶可以依據我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產品品牌:   http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序實驗流程:
DNA提取試劑盒是根據氯化芐法構建的,能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。氯化芐具有能將含有纖維素等的細胞壁中的羥基芐基化,從而破壞細胞壁的特性。本制品利用了氯化芐的這一特性,將植物樣品凍結融解后,再使用Pipet Tip的將植物樣品在Microtube壁上數次按壓即可破壞細胞壁。
保存方式
室溫。低溫保存可能會有沉淀析出。如果發生析出現象,請于50℃溶解后,再于室溫保存。
操作方法
全套操作約需1小時,分勻漿、細胞裂解、除蛋白、DNA純化等步驟,詳細說明如下。
一. 勻漿和細胞裂解。
使用不同的實驗材料需采用不同的勻漿步驟,具體說明如下:
【從動物組織中提取基因組DNA】
使用研缽進行勻漿時:
① 取1~100 mg的動物組織或人組織移入冰浴預冷的研缽中,快速用力展研成勻漿。
注)下列組織請加液氮研磨至粉末狀。
A.富含DNA酶的胰臟、脾臟、胸腺、淋巴等組織。
B.富含膠原蛋白的皮膚、肌腱等組織。
C.富含角質蛋白的組織或堅硬的組織(如骨骼)等。
② 加入650 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1,溫和研磨30秒鐘。
注)使用上述①-注)的實驗材料時,請在加入Solution A及RNase A1后,將研缽置于65℃水浴上研磨1分鐘。
③ 收集650 μl研磨好的組織勻漿液移至Collection Tube中。如果勻漿體積不足650 μl,請補充Solution A至650 μl,65℃保溫5分鐘。
二.使用研磨棒進行勻漿時:
① 取1~100 mg的動物組織或人組織移入冰浴預冷的Collection Tube 中,用研磨棒快速研磨成糊狀。
② 加入350 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1后用研磨棒快速研磨成勻漿。
③ 加入350 μl的Solution A將研磨棒上的勻漿沖入Collection Tube中,充分振蕩混合后,65℃保溫5分鐘。
三.使用懸浮培養的動物細胞時:
① 使用Collection Tube收集1×105~1.5×107的細胞懸浮液,5,000 rpm離心5分鐘,棄上清(細胞培養液)。
② 加入150 μl的滅菌蒸餾水或PBS懸浮細胞。
③ 加入500 μl的Solution A和0.8 μl的RNase A1,激烈振蕩15秒鐘,然后室溫靜置1分鐘。
四.使用貼壁細胞時:
① 棄盡培養液,向培養皿中加入650 μl的Solution A,室溫靜置1分鐘。
注)96孔板等的每個孔中一次容納不了650 μl 溶液時,請分數次處理細胞。
② 用移液槍的槍頭吹落貼壁培養細胞,取650 μl的細胞懸浮液轉移至Collection Tube中。
③ 加入0.8 μl的RNase A1,激烈振蕩15秒鐘,然后室溫靜置1分鐘。

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