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細胞活力檢測

來源:生物試劑銷售中心   2015年05月26日 21:25  

                                 細胞活力檢測

    在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞,總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力。由組織中分離細胞一般要檢查活力,以了解分離的過程對細胞是否有損傷作用;復蘇后的細胞也要檢查活力,了解凍存和復蘇的效果。細胞懸液制備后,zui常用活體染料臺盼藍對細胞染色,進行細胞計數。

    正常細胞胞膜完整,臺盼藍不能透過活細胞正常完整的細胞膜,故活細胞不著色;而喪失活性或細胞膜不完整的細胞胞膜通透性增加,臺盼藍能進入細胞內而使細胞著色(藍色)。

操作步驟

1. 配制4%臺盼藍母液:稱取4g臺盼藍,加少量蒸餾水研磨,加雙蒸水至100mL,用濾紙過濾,4℃保存。使用時用PBS稀釋至0.4%。

2. 胰酶消化貼壁細胞,制備單細胞懸液,并作適當稀釋(106 cells/mL)。

3. 取少量細胞懸液與0.4%臺盼藍溶液以9:1混合,輕輕吹打混勻,染色2~3min。

4. 顯微鏡下觀察,死細胞著淺藍色并膨大,無光澤;活細胞保持正常形態,無色透明有光澤。若需計算活細胞率則將染色的細胞懸液滴入細胞計數板計數。

活細胞率(%)= 活細胞總數/(活細胞總數+死細胞總數)×100%

注意事項:臺盼藍染細胞時,時間不宜過長。否則,部分活細胞也會著色,會干擾計數的準確性。

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