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全基因合成|實驗技術服務

來源:上海拜力生物科技有限公司   2015年05月15日 12:40  

關鍵詞:全基因合成|實驗技術服務
簡介:世界*品牌全基因合成|實驗技術服務原裝,質量保證,*。
全基因合成|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數據真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,客戶可以依據我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產品品牌:   http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序實驗流程:
DNA是十分龐大的生物分子。病毒含有幾千到幾十萬個核苷酸,原核生物的DNA分子平均為10E6個堿基對,真核生物的DNA分子可達l0E9個堿基對。按每個基因平均為1000個堿基對進行粗略的計算,大腸桿菌約有3000-4000個基因,而人類細胞的基因數目可高達200萬個。雖然其中某些基因,特別是真核細胞內的一些基因是多拷貝的,在基因組內有多個甚多個重復,實際基因數要比上述推算的基因數要少得多。盡管如此,原核細胞和真核細胞基因組內的基因數目仍然是極為驚人的。
人工合成
由于研究某些基因或者某種蛋白的生理作用,例如生理活性等,因此,需要通過人工實驗的方法合成一段全基因序列。
有效方法
經過基因工程學工作者艱苦細致的探索研究,人們現在已經掌握了分離和制造目的基因的一些有效方法。一般來說,目前獲取目的基因的方法主要有三種:反向轉錄法、從細胞基因組直接分離法和人工化學合成法,這些方法都有一個前提,就是已有文獻報道所研究的目的基因的蛋白序列或者基因的序列。
1、反向轉錄法
這種方法主要用于分子量較大而又不知其序列的基因,它以目的基因的mRNA為模板,設計上下游引物,借助反轉錄酶合成堿基互補的DNA片段,即cDNA,再在DNA聚合酶的作用下合成雙鏈cDNA,亦即目的基因的雙鏈DNA。
2、基因組擴增法
利用基因組抽提試劑盒,可以從細胞、植物、血液、動物組織中直接分離基因組,設計特異擴增的引物,利用抽提的基因組為模版,直接PCR擴增,以獲取目的基因。
3、人工合成
依照某一蛋白質的氨基酸序列,或基因序列,設計全長引物,利用OVERLAP方法形成模版DNA,再利用PCR擴增的方法得到雙鏈DNA,然后將PCR產物轉化克隆至克隆載體或者表達載體中。化學合成全基因目前是準確率zui高,速度zui快的方法,同時可以依據密碼子在不同宿主細胞的偏愛性和不同的實驗需求,設計基因序列,提高表達水平。

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