人熱休克蛋白70(HSP-70)免疫組化試劑盒?*

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1.一抗及標(biāo)記一抗抗體  2.二抗及標(biāo)記二抗抗體  3.蛋白及抗原  4.人Elisa試劑盒  5.小鼠Elisa試劑盒 6.大鼠Elisa試劑盒  7.豚鼠Elisa試劑盒  8.豬Elisa試劑盒  9.雞Elisa試劑盒  10.各種動物Elisa試劑盒  11.植物Elisa試劑盒  12.微生物Elisa試劑盒  13.分離試劑  14.酶與輔酶  15.蛋白質(zhì)  16.抗生素  17.放免試劑盒  18.各種動物細(xì)胞株、細(xì)胞系.....  等等

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人熱休克蛋白70(HSP-70)免疫組化試劑盒?*

【實驗原理】該試劑盒以HRP 標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRP Streptavidin Conjugate，

HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，zui后加入HRP-SA，形成抗原—特異一抗—生物素化二抗—HRP-SA 復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。

【試劑盒所含試劑】

試劑A 通透液：0.1% Triton-X 100   10ml（選用）

試劑B 封閉緩沖液（封閉用） 20 mL

試劑C （*分裝）已稀釋的即用型一抗（2.5ml）

試劑D （*分裝）生物素化羊抗兔IgG 1 支

（濃度1.5 mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50 μL+抗體稀釋液20ml

試劑E HRP-SA 復(fù)合物1 支（濃度1 μM，稀釋比1:50~1:200）100 μL

試劑F DAB 顯色液  5ml

人熱休克蛋白70(HSP-70)免疫組化試劑盒?*

【注意事項】

1. 修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。

2. 緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。

3. 若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。

4. 封片前一定要換用TBS 充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween 20，否則會影響結(jié)果觀察。

5. 如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進行封片。

【抗原修復(fù)方法】

常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01M pH6.0）、EDTA 抗原修復(fù)液（pH8.0 或

9.0）等等。

一、酶消化修復(fù)法

切片脫蠟水化處理，TBS 沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育

20~30min 后TBS 沖洗即可。

二、微波抗原修復(fù)法

微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料

切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波

盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異，

須自行調(diào)整。

三、直接高壓抗原修復(fù)法

取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)

液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計時1.5~2.5min 即可脫離熱源，自

然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。

四、隔水式高壓抗原修復(fù)法

不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸

騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計時

4~8 min 即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用

于較難檢測或核抗原的修復(fù)。

【保存】：2-8℃

【保質(zhì)期】：6個月