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人熱休克蛋白70(HSP-70)免疫組化試劑盒?*

來源:上海安妍生物有限公司   2015年04月09日 10:35  

人熱休克蛋白70(HSP-70)免疫組化試劑盒?*

【規格】:50T       100T

【價格】:1680元    2480元 

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人熱休克蛋白70(HSP-70)免疫組化試劑盒?*

【實驗原理】該試劑盒以HRP 標記的鏈霉親和素復合物(HRP Streptavidin Conjugate,

HRP-SA)為基礎,可用于檢測細胞、組織內的特異性抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強、定性定位準確、背景清晰。在所用的一抗與相應靶抗原結合后,用生物化二抗與一抗特異性結合,zui后加入HRP-SA,形成抗原—特異一抗—生物素化二抗—HRP-SA 復合物,顯微鏡下觀察成像。

【試劑盒所含試劑】

試劑A 通透液:0.1% Triton-X 100   10ml(選用)

試劑B 封閉緩沖液(封閉用) 20 mL

試劑C (*分裝)已稀釋的即用型一抗(2.5ml)

試劑D (*分裝)生物素化羊抗兔IgG 1 支

(濃度1.5 mg/mL,稀釋比為1:300~1:500)50 μL+抗體稀釋液20ml

試劑E HRP-SA 復合物1 支(濃度1 μM,稀釋比1:50~1:200)100 μL

試劑F DAB 顯色液  5ml

人熱休克蛋白70(HSP-70)免疫組化試劑盒?*

【注意事項】

1. 修復后緩沖液須自然冷卻,自來水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導致結晶或抗原封閉。

2. 緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過的檸檬酸緩沖液不能反復使用。

3. 若試劑為微量濃縮液,用前應低速離心,將內蓋和管壁附著的溶液離到底部。

4. 封片前一定要換用TBS 充分洗滌,以便洗去組織上殘留的Tween 20,否則會影響結果觀察。

5. 如須復染細胞核,則在封片前復染或直接采用含有染核試劑的封片劑進行封片。

【抗原修復方法】

常用抗原修復液:檸檬酸緩沖液(0.01M pH6.0)、EDTA 抗原修復液(pH8.0 或

9.0)等等。

一、酶消化修復法

切片脫蠟水化處理,TBS 沖洗,在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶,37℃孵育

20~30min 后TBS 沖洗即可。

二、微波抗原修復法

微波盒中加入抗原修復液微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料

切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔或繼續微波10~15min,取出微波

盒冷卻至室溫后,自來水沖洗,取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異,

須自行調整。

三、直接高壓抗原修復法

取修復液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰,將組織切片置于耐高溫切片架上,修復

液沸騰后放入切片架,蓋上鍋蓋,待噴氣后計時1.5~2.5min 即可脫離熱源,自

然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復。

四、隔水式高壓抗原修復法

不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰,微波盒中加入修復液于微波爐中加熱至沸

騰,將切片放入微波盒中,再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋,待噴氣后計時

4~8 min 即可關閉熱源,自然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用

于較難檢測或核抗原的修復。

【保存】:2-8℃

【保質期】:6個月

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