人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒說明書

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1.一抗及標(biāo)記一抗抗體  2.二抗及標(biāo)記二抗抗體  3.蛋白及抗原  4.人Elisa試劑盒  5.小鼠Elisa試劑盒 6.大鼠Elisa試劑盒  7.豚鼠Elisa試劑盒  8.豬Elisa試劑盒  9.雞Elisa試劑盒  10.各種動物Elisa試劑盒  11.植物Elisa試劑盒  12.微生物Elisa試劑盒  13.分離試劑  14.酶與輔酶  15.蛋白質(zhì)  16.抗生素  17.放免試劑盒  18.各種動物細(xì)胞株、細(xì)胞系.....  等等

公司產(chǎn)品經(jīng)無數(shù)次市場驗(yàn)證，若出現(xiàn)質(zhì)量問題可無條件換貨或退貨。

【實(shí)驗(yàn)原理】：試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中指標(biāo)的水平，用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入相應(yīng)的抗原，再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中指標(biāo)的濃度/含量等。

【標(biāo)本要求】：

1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒說明書

Materials provided with the kit

Materials provided with

the kit

48determinations 96 determinations Storage

User manual 1 1

Closure plate membrane 2 2

Sealed bags 1 1

Microelisa stripplate 1 1 2-8℃

Standard：10.8U/L 0.5ml×1 bottle 0.5ml×1 bottle 2-8℃

Standard diluent 1.5ml×1 bottle 1.5ml×1 bottle 2-8℃

HRP-Conjugate reagent 3ml×1 bottle 6ml×1 bottle 2-8℃

Sample diluent 3ml×1 bottle 6ml×1 bottle 2-8℃

Chromogen Solution A 3ml×1 bottle 6ml×1 bottle 2-8℃

Chromogen Solution B 3ml×1 bottle 6ml×1 bottle 2-8℃

Stop Solution 3ml×1 bottle 6ml×1 bottle 2-8℃

wash solution

（20ml×20 fold）

×1bottle

（20ml×30 fold）

×1bottle

2-8℃

Specimen requirements

1. serum- coagulation at room temperature 10-20 mins，centrifugation 20-min at the speed of

2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.

2. plasma-use suited EDTA, citrate or heparinized plasma as an anticoagulant,mix 10-20

mins ,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If

precipitation appeared, Centrifugal again.

3. Urine-collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m.

remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again. The Operation of

Hydrothorax and cerebrospinal fluid Reference to it.

4. cell culture supernatant-detect secretory components, collect sue a sterile container,

centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant,detect the

composition of cells, Dilut cell suspension with PBS（PH7.2-7.4）, Cell concentration

reached 1 million / ml, repeated freeze-thaw cycles, damage cells and release of

intracellular components, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove

supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.

5. Tissue samples- After cutting samples, check the weight,add PBS（PH7.2-7.4）, Rapidly

frozen with liquid nitrogen, maintain samples at 2-8℃ after melting,add PBS（PH7.4）,Homogenized by hand or Grinders, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m.

remove supernatant.

6. extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant

literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t,

specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.

7. Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.

人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒說明書

【樣本的處理】：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

【注意事項(xiàng)】：

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

1. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
2. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。

【保存】：2-8℃

【保質(zhì)期】：6個(gè)月