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包被的條件：
Ph9.6碳酸鹽緩沖液；
pH7.2磷酸鹽緩沖液；
Ph7-8 Tris-HCl緩沖液；
加入包被液后，在4-8℃冰箱中放置晝夜，37℃中保溫2小時。包被濃度隨載體和包被物的性質可能有很大的變化，每批材料需通過實驗與酶結合物的濃度協(xié)調選定。一般蛋白質的包被濃度為10ng/mL-20ug/mL。
封閉：
在包被后，用高濃度的無關蛋白質溶液再包被的過程。封閉讓大量無關的蛋白質充填這些空隙，從而排斥ELISA后步驟中干擾物質的再吸附。
常用的封閉劑：0.05%-0.5%BSA；10%的小牛血清或1%明膠；脫脂奶粉，比較價廉，可以用高濃度（5%）。
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