常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔,洗滌后每孔內(nèi)加入適當(dāng)稀釋度的酶標(biāo)抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應(yīng)后,分別測每孔溶液的吸光度。控制反應(yīng)條件,使各孔讀數(shù)在吸光度0.8左右。計(jì)算全部讀數(shù)的平均值。所有單個(gè)讀數(shù)與全部讀數(shù)的均數(shù)之差,應(yīng)小于10%。以下以A、B、C三款酶標(biāo)板為例。
直接法:檢測Human IgG在酶標(biāo)板表面的吸附
由上圖可以看出,這三類酶標(biāo)板中,A類酶標(biāo)板具有更好的蛋白吸附效果,同時(shí)也提高蛋白吸附的靈敏度,能夠提供更為可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
另外,可以詢問酶標(biāo)板的批內(nèi)差異,以下是某款酶標(biāo)板的批內(nèi)差異。

由批內(nèi)差異數(shù)據(jù)圖可以看出,該酶標(biāo)板具有很好地批間穩(wěn)定性,批內(nèi)變異系數(shù)(CV)差異均在5.0%附近,明顯低于業(yè)內(nèi)關(guān)于臨床免疫反應(yīng)用酶標(biāo)板的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)中批內(nèi)變異系數(shù)低于10.0%的要求,因此也適合用于ELISA實(shí)驗(yàn)。
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