細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項(xiàng)

來源：上海心語生物科技有限公司 2015年01月23日 09:57

1.打開無菌工作臺(tái)及凈化室的紫外燈，消毒半小時(shí)以上。

2.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈，打開超凈臺(tái)風(fēng)機(jī)，等待30min以上，以排盡臭氧。

3.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。

4.風(fēng)淋2分鐘。

5.0.1%過氧乙酸水泡手，擦干。

6.點(diǎn)燃酒精燈;超凈臺(tái)內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。

7.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。

8.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺(tái)，應(yīng)使瓶口斜置，應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。

9.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個(gè)不同的細(xì)胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。

10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺(tái)上的液體，立即用酒精棉球擦凈。

11.操作完畢后恢復(fù)工作臺(tái)面。

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