成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養箱


化工儀器網>技術中心>其他文章>正文

歡迎聯系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

CHIP心得體會

來源:廣州譽維生物科技儀器有限公司   2014年12月12日 17:13  

1、cell counting:盡量做到準確,會影響input結果。

 

2、cross link:甲醛的終濃度是1%,這個基本所有的protocol上都會強調。

 

3、resuspend cellswith SDS:一定要選用小的tip頭,在液面下吹打,否則很容易產生氣泡,后面的sonication就麻煩了。

 

4、sonication:ChIP中zui重要的一部分,合適的條件要自己摸索,可以一次嘗試不同次數的sonication,然后建議采用EZ-ChIP上推薦的方法看看sonication的效果如何。

 

5、加入salmon spermDNA/Protein A or G之前要先混勻,因為salmon sperm DNA是很粘稠的物質,若不混勻,后面你會發現beads的量不一樣,自然也會影響實驗的結果。

 

6、wash 的時候前面幾個步驟可以不用洗的太干凈,但zui后一個要盡量吸干凈,必要時可用gel loading tips吸。

 

7、含beads的samples離心時,有的protocol上推薦是1000rpm,45秒,但可以根據情況調整,但要注意轉速不能太快防止beads破碎。(當然如果采用的是magnetic的beads就不存在這個問題)

 

8、reverse crosslink可以是65°4個小時,也可以overnight。

 

9、reverse crosslink后的在進行下面步驟之前建議先離心,把蒸發到離心管蓋子上的部分離下來。

 

10、每次行real time PCR之前都要把sample離心保證取樣的準確。

 

11、1~10ul的槍取3ul以上才比較準確,所以考慮好自己PCR反應體系的配置。

 

12、一個ChIP一般需要3~4天的時間,其中有幾個步驟是可以停下來的:

 

(1)細胞收集:用含蛋白酶抑制劑的PBS洗滌離心,去上清的細胞收集液可置-80°凍存;

 

(2)用SDS重懸細胞后可置-80°凍存;

 

(3)sonication結束,離心后的上清置新的離心管后可-80°凍存;

 

(4)reverse cross-link后的標本可-80°凍存。

 

13、agarose beads 的wash過程中以及后面的DNA提取過程中乙醇的wash,可以用細胞室的那種吸引器,接上200ul的tip頭吸,這樣會節省很多時間(每個實驗室情況可能不一樣)。

 

14、DNA提取后建議用水溶解DNA,因為TE buffer里的EDTA可能會影響PCR反應體系中的Mg2+。

 

15、溶解DNA的水量可以根據PCR反應體系的要求適當調整。

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。
企業未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
主站蜘蛛池模板: 国产在线二区三区熟女A级| 亚洲AVAV天堂AV在线网爱情| 性一乱一搞一交一伦一性| 韩国A片三級三級三級| 亚洲午夜精品一区二区| 黑料网-独家爆料破解版| 精品久久日产国产一二三区| 亚洲午夜久久久无码精品网红A片| 欧美亚洲另类一区二区三区| 亚洲国产网站| 好吊射视频988gaocom| 日本韩国理论片| 久久精品国产亚洲av麻豆一| 免费观看又色又爽又黄的软件| 欧美日韩免费在线看| 日韩精品久久久中文字幕人妻| 亚洲毛片无码专区亚洲A片| 宝贝乖女肉欲| 免费看人与动人物XXXX| 日韩欧美一级片| 激情A片久久久久久播放| A片试看120分钟做受图片| 亚洲第一网av| 亚洲欧美日韩中文在线| 午夜福利1000集看看| 久久久乱码精品亚洲日韩小说| 久久久久久久久九九九| 琪琪伦伦影院理论片| 欧美 日韩 国产 精品| poopingxxxxhd| 亚洲欧美精品日韩| 上课被同桌用震蛋折磨喷汁| 亚洲精品AAA揭晓| 国产午夜精品理论片| 久久99国产精品二区不卡| 久久亚洲欧美综合激情一区| 国产欧美日韩精品A在线观看| 蜜桃av一区二区| 国产乱理伦片在线观看网站| 两个女人互添下身爽舒服小说| 国产xxx视频在线观看|