腫瘤細胞培養方法

腫瘤細胞的特點

細胞保持永生性：自我復制

形態學：大小不一  ~ 逐漸一致

增殖力更強：DNA合成期、分裂期達50%

突變性：不同于正常細胞，失去穩定的控制高分化 變低分化

表面性狀：負電荷數量>正常，貼壁性¯，抗原性可變異

成瘤性：移植到動物體內可成瘤

腫瘤細胞的培養：

與常規細胞培養技術相同。一個細胞群體，存在多種亞群，復雜性，建株細胞較正常細胞易于培養，不同亞群代表不同分化程度的細胞群表型、形態、受體、對因子的反應等均不同，不同亞群釋放不同的正負調節因子 (陰陽調控)。

影響腫瘤細胞生長的因素：

• PH
• 營養：如血清效價低
• 細胞生長因子的自分泌及旁分泌
• 癌基因抑癌基因的變化
• 排泄廢物的影響
• 細胞外基質的作用
• 細胞相互間的作用
• 污染

原代培養：去除纖維細胞及淋巴細胞，防止細菌、真菌污染。

傳代培養：增殖力低的細胞需要飼養，細胞適當密度, 基本長滿后傳代, *代不穩定，注意培養條件，適當調整培基。

腫瘤治療的研究：

治療藥物敏感性的鑒定與篩選

腫瘤的多藥耐藥性的鑒定

各種新藥治療的實驗研究

體外：腫瘤的生長（³HTdr摻入）腫瘤的殺傷率（MTT、⁵¹Cr釋放）

體內：裸鼠或免疫功能抑制鼠，成瘤率、抑瘤、生長率、轉移率、生存時間及死亡率作用機理的研究：基因、蛋白、酶、標志、受體

腫瘤細胞培養的應用：

腫瘤細胞的遺傳特性：各種癌基因及抑癌基因的分析、染色體定位（FISH法）

腫瘤細胞的生物學行為：細胞周期（FACS)、信號傳遞

腫瘤細胞的標志與激素、受體變化（免疫細胞化學、放射自顯影、酶免疫、熒光免疫、放射免疫、免疫印跡

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