ELISA試劑盒但應(yīng)避免反復(fù)凍融

實驗原理：  

  本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人乙酰肝素酶(HPA）水平。用純化的人乙酰肝素酶(HPA）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入乙酰肝素酶(HPA），再與HRP標(biāo)記的乙酰肝素酶(HPA）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乙酰肝素酶(HPA）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人乙酰肝素酶(HPA）濃度。

ELISA試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度，損失越少，回收率越高，如果作標(biāo)液1PPM，就是1毫克/升，而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升，就是說你的回收率是99％，這個與真實成分有密切的關(guān)系，說明方法的準(zhǔn)確度。ELISA試劑盒比如水中總無機(jī)氯含量測定, ELISA試劑盒樣品水中含有無機(jī)氯 20 mg/L, 取 100mL 被測水樣品, 加入 0.1mL 濃度為 10mg/mL 的含無機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品, 測定時忽略體積變化, 如果測定出樣品中無機(jī)氯為 2.98mg/L, ELISA試劑盒則認(rèn)為回收率為98%。

樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，

雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒 
雞B因子(BF)ELISA試劑盒
雞5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒 
雞層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 
雞17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒
雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒
雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒
雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 
雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒 
雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒
禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒
鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒
鴨白介素4(IL-4)ELISA試劑盒
鴨白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
鴨子碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒
鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒
鴨環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒
鴨免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒 
鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒
鴨白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 
鴨白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 
鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
綿羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒
綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
綿羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒
綿羊白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 
綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒
綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒
綿羊補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒
綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒
猴白介素4(IL-4)ELISA試劑盒
猴白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
猴Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒